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跨膜蛋白173对TGF-β1活化的肝星状细胞增殖与凋亡的影响及机制研究

2021-10-14潘林鑫

中国药理学通报 2021年10期
关键词:水平检测

潘林鑫,李 玉,徐 涛,钱 成

(安徽医科大学 1.生命科学学院,2.药学院,3.科研实验中心,4.炎症免疫性疾病安徽省实验室,安徽 合肥 230032)

肝炎是一种常见的消化系统疾病,其种类繁多、病因复杂、发病率高,且随着病情的发展,肝脏细胞遭到持续地破坏,细胞外基质(extracellular matrix,ECM)成分过度异常地沉积,导致肝脏结构发生病理性改变,损害肝脏代谢功能,进一步发展成为肝纤维化,甚至肝癌,严重威胁着人类的生命健康[1-2]。肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)是ECM的主要来源,其持续增殖与活化是肝脏炎性损伤和纤维化的关键环节[3-4],在肝细胞癌的发病机制中也扮演着重要角色[5]。TMEM173是一种存在于宿主细胞内质网膜上的跨膜蛋白,人源的TMEM173由379个氨基酸组成,其N端(1~137AA)为4次跨膜结构域,C端包含一个CTD结构域,可以结合胞质中细菌分泌的重要第二信使环二核苷酸(cyclic dinucleotides,CDNs),激活TBK1和IRF3抗病毒细胞信号通路,诱导抗感染的固有免疫反应[6-7]。有研究表明TMEM173与非酒精性脂肪肝和肝细胞癌的发生发展密切相关,且在HSC活化过程中扮演着重要角色[8-9],本研究通过构建pEGFP-C2-TMEM173表达载体和设计合成TMEM173-siRNA来调节TMEM173在活化LX-2细胞中的表达变化,旨在研究TMEM173对HSC活化过程中细胞增殖和凋亡的调控作用,为进一步探究其在肝炎和纤维化中的功能奠定基础,现报道如下。

1 材料与方法

1.1 载体、菌株和细胞pEGFP-C2载体、DH5α感受态菌株、LX-2细胞株由校实验中心实验室保存。

1.2 主要试剂引物合成自安徽通用生物有限公司;T4 DNA连接酶(B110041)购于生工生物公司;DMEM培养基(SH30081.01)购于澳洲HyClone公司;胎牛血清(FB25015)购于美国CLARK公司;……

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