张兴业，田博，郭少春，贺延莉

空军军医大学唐都医院1神经外科，2放射科，西安 710038

prospero同源框1（prospero homeobox 1，PROX1）是Prospero基因相关的转录因子，属于同源盒转录因子中的一员，在哺乳动物各器官包括中枢神经系统的发展中起着至关重要的作用。它通过不同的转录调控方式控制细胞的增殖和分化，具有致癌或抑癌功能。研究发现，PROX1可调控食管癌、口腔癌、小细胞肺癌和肝癌等多种肿瘤的发展。早期研究显示，PROX1在胶质瘤细胞株中表达，且其表达与胶质瘤病理分级呈正相关。然而PROX1在胶质瘤细胞中的作用尚不清楚。本研究旨在探讨PROX1对胶质瘤细胞生物学功能的影响，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 细胞与材料

正常人胶质细胞系HEB购自中国科学院广州生物医药与健康研究院；人胶质细胞瘤细胞（glioblastoma，GBM）系 A172（GBM，Ⅳ级）、U87MG（GBM，Ⅳ级）、U-118MG（GBM，Ⅳ级）、SHG-44（GBM，Ⅳ级）和U251（GBM，Ⅳ级）均购自中科院细胞库。DMEM培养基购自美国Hyclone公司；胎牛血清购自美国Gibco公司；Trizol试剂盒和Lipofectamine™2000转染试剂均购自美国Invitrogen公司；噻唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）购自美国Sigma公司；Transwell小室购自美国R&D公司；聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）试剂盒购自日本TaKaRa公司。PROX1引物、GAPDH引物均由中国上海生工生物工程有限公司合成；兔抗人E-钙黏蛋白（E-cadherin）抗体、N-钙黏蛋白（N-cadherin）抗体、波形蛋白（Vimentin）抗体、β-肌动蛋白（β-actin）抗体和辣根过氧化物酶标记的羊抗兔二抗均购自美国Abcam公司；PROX1 siRNA、scramble siRNA均购自美国Santa Cruz公司。

1.2 细胞培养

细胞于含10%胎牛血清的DMEM培养基中，置于37℃、5% CO细胞培养箱中培养，待细胞生长至80%融合时进行传代。

1.3 转染及分组

将细胞接种于6孔板，待融合率达80%，将细胞分为对照组、scrambled siRNA组和PROX1 siRNA组。PROX1 siRNA组用Lipofectamine™2000将PROX1 siRNA转染细胞，scrambled siRNA组转染scrambled siRNA，作为阴性对照。……