丁华强 廖 帅 汪棋笙 全星运 刘胜杰 廖落星 刘 亮

目前，颅脑损伤（traumatic brain injury，TBI）是导致青壮年死亡和残疾的主要原因，成为日益严重的公共卫生问题[1]。TBI 后神经细胞凋亡是导致神经功能缺损的主要原因。细胞凋亡分子通路主要包括Caspase 依赖性通路和非Caspase 依赖性通路[2]。凋亡诱导因子（apoptosis inducing factor，AIF）在非Caspase 依赖性通路中发挥重要作用。研究表明，TBI 后神经细胞凋亡与AIF 核转位有关[3，4]。虽然亚低温能通过降低颅内压、减轻神经炎症反应及细胞兴奋性毒性和抑制神经细胞死亡等机制阻止TBI继发性损伤，从而起到神经保护作用[5～10]，但是临床亚低温治疗TBI仍存在一定的争议。以往有关亚低温对TBI 后神经细胞死亡的作用研究主要集中在对Caspase 依赖性通路[8，9，11]。本研究通过观察亚低温对大鼠TBI 后非Caspase 依赖性神经细胞凋亡通路中关键蛋白AIF 定位表达的影响，为临床亚低温治疗TBI提供参考。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组 取36只清洁级成年雄性SD大鼠[体重300～350g，由西南医科大学动物实验中心提供（许可证号：SYXK-2018-065）]，采用随机数字表法分为3 组：假手术（n=12）、TBI 组（n=12）和亚低温组（n=12）。

1.2 TBI模型的制备 采用控制性皮质撞击法制作大鼠TBI 模型[12]。术前禁食12 h，腹腔注射3%水合氯醛（1 ml/100g）麻醉，俯卧位固定于立体定向头架上。沿中线切开头皮，暴露右顶骨，颅骨矢状缝中点旁约2 mm 处，牙钻钻直径6 mm圆形骨窗，暴露硬脑膜。致伤参数：打击速度4.0 m/s，打击深度2.8 mm，停留时间50 ms，打击头直径5.0 mm。假手术组大鼠只暴露硬脑膜不予以CCI打击。

1.3 亚低温的实施 亚低温组参照Jiang等[6]报道的方法，采用冰浴加间断使用冰袋的方法降温，15 min内使直肠温度降至（33.0±1.0）℃，并维持6 h，治疗结束后自然复温至37 ℃。……