王菲菲，孙丽蕴，白彦萍

银屑病是一种T淋巴细胞介导的慢性复发性炎症性皮肤病，多基因背景与环境因素相互作用所导致的免疫失衡是其发病的主要原因。患者的皮损表现、疾病严重程度以及病程均存在不同程度的差异，但也给患者带来沉重的经济和精神负担[1]。microRNA（miRNA）是一类在动植物及病毒中广泛存在的长度一般为19～25个核苷酸组成的单链小分子非编码RNA，通过基因切割和翻译抑制的方式直接调控基因组中30%以上的蛋白编码基因的表达[2]，调节机体免疫反应、细胞增殖、分化和凋亡参与银屑病发病过程[3]。本研究通过检测银屑病患者外周血单个核细胞（PBMC）中差异表达的miRNA，并预测其靶基因，研究其在银屑病中的作用机制[4,5]。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 病例资料 选取2016年2—12月在中日友好医院就诊的寻常性银屑病患者15例，其中男10例，女5例，年龄18～65岁，平均年龄（37.5±7.5）岁，病程1～20年，平均病程（8.1±5.5）年。所有患者近3个月未进行过系统治疗，且无其他免疫系统疾病。同期选体检中心健康者14例，男8例，女6例，平均年龄（38.1±9.4）岁，与银屑病组患者在性别、年龄等一般资料方面无差异。银屑病组中选取5例患者的样本、健康对照组中选取4例健康者的样本用于芯片检测。

1.1.2 主要试剂和仪器 Trizol试剂（美国Invitrogen公司），RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit（美国Thermo公 司），FastStart Universal SYBR Green Master（Rox）（瑞士Roche公司），RNA洗脱纯化试剂盒（美国Qiagen公司），MirVanaTMmiRNA分离试剂盒（美国Ambion公司），Human miRNA Microarray，Release 21.0，8×60K芯片（Agilent公司），本实验芯片部分在北京博奥晶典完成，其他相关试剂均由该公司提供。Agilent芯片扫描仪（G2565CA），荧光定量聚合酶链反应（PCR）仪（美国BIO-RAD公司）。……