李卫霞， 刘晓霞， 陈剑华 ，郭旭丽 ，王雪玲 ，霍忠超

(1. 河北工程大学医学院 免疫教研室，邯郸 056038； 2. 河北工程大学附属医院 肿瘤科，邯郸 056038)

大气污染物中直径≤2.5 μm的细颗粒物(diameter≤2.5 μm particular matter, PM2.5)粒径小、表面积大、吸附能力强，易于吸附重金属、细菌、病毒等有害物质，具有较强的致病性[1]。流行病学调查显示，PM2.5与人体各系统如呼吸系统、心血管系统、免疫系统等疾病的发生发展密切相关[2-5]。研究表明，PM2.5暴露能导致肺部氧化应激性损伤，促进上皮细胞分泌炎性因子，加重炎症反应[6]。此外，PM2.5还可影响免疫系统功能，使机体的抗感染能力降低，但PM2.5对人T细胞转化功能的影响和具体机制尚不明确。研究用植物凝集素(phytohemagglutin，PHA)刺激人外周血T细胞转化，同时加入不同浓度PM2.5共培养，观察PM2.5染毒对人T细胞转化功能的影响及其可能作用机制。

1 材料与试剂

1.1 外周血样本的采集采集12例健康男性志愿者外周血(均为河北工程大学医学院青年教师及学生志愿者)，年龄20～40岁，无急、慢性疾病、免疫相关疾病史，近期无服药史。

1.2 试剂与仪器人外周血淋巴细胞分离液，购自北京索莱宝科技有限公司；RPMI 1640细胞培养液，购自Gibco公司；PHA，购自Sigma-Aldrich公司；活性氧类(reactive oxygen species，ROS)检测试剂盒，购自南京建成生物工程研究所；8-OHdG检测试剂盒，购自武汉华美生物工程有限公司；CCK-8检测试剂盒，购自碧云天生物技术研究所；IL-6和TNF-α ELISA检测试剂盒，购自Abcam公司。石英纤维滤膜，购自颇尔(中国)有限公司；VFC-PM2.5型大流量采样器，来自Thermo Fisher Scientific公司；F-2700荧光分光光度计，来自日立(中国)有限公司；iMark酶标仪，来自Bio-Rad公司。……