郭月仙 马立验 骆伏海 苏贵平

（1宁德市益智源农业开发有限公司，福建宁德355300；2宁德市食用菌技术推广站，福建宁德352100）

玉木耳（Auricularia cornea）为李玉院士团队由白色毛木耳变种经多孢自交选育出的菌株[1]。玉木耳味道鲜美，且富含蛋白质、膳食纤维、多糖、不饱和脂肪酸，具有抗肿瘤、抗氧化等功效[2]，深受消费者青睐。玉木耳在我国台湾地区、福建省、江西省等均有少量栽培，应用菌种主要是固体菌种。随着食用菌产业向设施化、标准化转型升级，液体菌种应用越来越多，也日益成熟[3]。刘孝利等[4]研究了玉木耳液体菌种培养基配方。试验根据玉木耳的生物学特性，进行液体菌种的培养基配方、培养温度、初始pH比较，以期筛选出玉木耳液体菌种较佳的培养条件。

1 材料与方法

1.1 玉米耳菌株

玉木耳1号菌株，由福建省南平农科所提供。

1.2 试验设计及方法

1.2.1 培养基配方比较试验

试验液体培养基配方：①马铃薯100 g，红糖15 g，葡萄糖10 g，麸皮30 g，蛋白胨1.5 g，磷酸二氢钾0.75 g，硫酸镁1 g，维生素B11片，加水1 000 mL；②玉米粉40 g，麸皮20 g，葡萄糖30 g，黄豆粉5 g，磷酸二氢钾2.5 g，硫酸镁1 g，维生素B11片，水1 000 mL；③葡萄糖20 g，玉米粉5 g，豆粉5 g，磷酸二氢钾0.5 g，硫酸镁0.5 g，酵母粉1 g，消泡剂0.2 g，加水1 000 mL。

配制培养基时微溶性的麸皮、玉米粉、黄豆粉均研磨成粉末状，马铃薯用清水煮30 min后过滤残渣，并将马铃薯水煮液用清水调至1 000 mL，再加入其他原料搅拌均匀即可。用1 000 mL三角瓶分装培养液，每瓶装液量为500 mL，用棉塞封口，并用牛皮纸包紧瓶口后，于121℃灭菌35 min。冷却到常温后，在净化室接种，每瓶接8块0.5 cm2的PDA斜面菌种块。接种后于25℃静置24 h，随后在转速170 r/min、22℃的恒温摇床上培养6 d。测菌丝鲜重，记录菌球形态。每配方重复3次。

1.2.2 液体菌种培养温度试验

培养基用配方③。培养温度设20℃、22℃、24℃。培养基配制、培养方法同1.2.1。每个温度处理重复3次。

1.2.3 液体培养基初始pH试验

培养基用配方③。初始pH设为pH5.5、6.5、7.5。其他同1.2.1。每个pH处理重复3次。

1.2.4 培养瓶接种量试验

试验采用配方③。设每个三角瓶接种量为1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、5 mL。其他同1.2.1。每个接种量处理重复3次。

2 结果与分析

2.1 液体培养基配方的试验结果

菌丝鲜重是评价液体菌种质量优劣的重要指标。由表1可知，玉木耳菌丝鲜重由高到低的顺序是配方③＞配方①＞配方②，配方③的玉米耳菌丝平均鲜重为265.7 g/L，为三个配方中最高，与配方①差异不明显，与配方②差异显著。菌球均一性最好的是配方③，配方①和配方②相近。供试配方培养的菌球颜色均为淡黄色，但配方①与配方②的菌液颜色较深，而配方③不管在接种前还是接种后培养液透明度都较好，有利于观察菌球生长情况（图1，图2）。试验结果表明配方③为供试较佳配方，选择其进行后续试验。

表1 不同液体培养基配方的玉木耳菌丝生长情况

图1 接种前供试液体培养基状态

图2 供试配方培养菌种6 d后菌液状态

2.2 液体菌种培养温度试验结果

由表2可知，培养温度为22℃时，玉米耳菌丝鲜重最高，为263.7 g/L，与培养温度24℃的菌丝鲜重（262.3 g/L）差异不明显，与培养温度20℃的菌丝鲜重差异显著。因此，22℃为培养玉米耳液体菌种适宜的温度。

表2 不同温度培养玉木耳液体菌种菌丝生长情况

2.3 液体培养基初始p H试验结果

由表3可知，当培养基初始pH为6.5时，菌丝鲜重最高为251.7 g/L，与初始pH5.5、pH7.5时的菌丝鲜重差异达极显著水平，且菌球均一性及颜色的差异较明显。因此，玉木耳液体培养基最适合初始pH为6.5。

图3 不同温度培养菌种6 d菌液状态

图4 不同初始p H液体培养基培养菌种6 d后菌液状态

2.4 培养瓶不同接种量试验结果

图5 不同接种量培养液体菌种6 d菌液状态

由表4可知，培养瓶接种量1 mL/瓶的菌丝鲜重与接种量2 mL/瓶差异不明显，与接种量3 mL/瓶、4 mL/瓶、5 mL/瓶的菌丝鲜重均差异极显著。但不同接种量菌液颜色、菌球均一性无明显差异。因此，在培养玉木耳液体菌种时，若有条件应适当增加接种量来提高液体菌种的菌丝量，从而增加接种后萌发点。

表4 培养瓶不同接种量试验结果

3 小结

试验筛选出适宜玉木耳液体菌种培养基：葡萄糖20 g，玉米粉5 g，豆粉5 g，磷酸二氢钾0.5 g，硫酸镁0.5 g，酵母粉1 g，消泡剂0.2 g，水1 000 mL。培养条件为：适宜培养温度为22℃，培养液初始pH为6.5，条件允许接种量提高至3 mL以上。近两年来示范推广该培养条件培养的液体菌种栽培玉木耳3×105袋，不仅提高了生产效率，且玉木耳产量稳定、质量良好。