方文明，胡张捷，戴灵豪，刘 艺，王慧铭，王 辉

（浙江中医药大学，浙江 杭州 310053）

糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）是临床上最常见的糖尿病微血管并发症之一，主要病理特征是肾小球肥大、肾小球和肾小管基底膜增厚、系膜区细胞外基质的进行性积累，后期造成肾小球、肾小管间质纤维化［1⁃2］，肾小管上皮细胞转分化（tubular epithelial to mesenchymal transdifferentiation，TEMT）是肾间质纤维化的重要机制之一，TGF⁃β／Smad 信号通路起了重要作用。在高糖状态下，肾小管上皮细胞中TGF⁃β／Smad 信号通路激活可增加miR⁃21 的表达［3］，后者通过结合于靶mRNA 的3’UTR 端抑制张力蛋白同源的磷酸酯酶基因（phosphatase and tensin homolog，PTEN）的表达，进一步刺激PI3K／Akt 通路从而激活下游激酶引起肾间质肥大、细胞外基质（ECM）异常沉积和足细胞凋亡［4］，表 明TGF⁃β1／miR⁃21／PTEN／PI3K／Akt 信号通路与DN 发生和发展密切相关。

中医将糖尿病归属“消渴病”范畴，气虚血瘀是其基本病机［5］，中药复方具有多靶点、多途径的特点，在防治DN 方面具有独特的优势，临床常用益气活血法治疗［6］。课题组前期证实，益气活血方能有效改善DN［7］，本实验在此基础上考察该方是否通过调控TGF⁃β1／miR⁃21／PTEN／Akt 信号通路来改善血糖波动型GK 大鼠肾损伤，以期为其进一步开发利用提供依据。

1 材料

1.1 动物 SPF 级雄性Wistar 大鼠，6 只，体质量（250±20）g；SPF 级雄性自发性糖尿病大鼠，42 只，体质量（250±20）g（GK 大鼠），均购自上海上海斯莱克实验动物有限公司，实验动物生产许可证号SCXK（沪）2017⁃0005，饲养于浙江中医药大学动物实验研究中心屏障系统内，实验动物使用许可证号SYXK（浙）2018⁃0012。

1.2 药物 门冬胰岛素注射液（批号KVGY963⁃1，丹麦诺和诺德公司）；缬沙坦（批号H20170166，瑞士诺华制药有限公司）均购自浙江省中医院；……