茯苓酸对舌鳞状细胞癌细胞CAL⁃27 增殖、凋亡及细胞周期的影响
2021-09-27樊燕青孙兰池李大鹏
樊燕青,孙兰池,李大鹏
(1.昆明医科大学,云南 昆明650500; 2.大同市第三人民医院口腔科,山西 大同 037000)
舌鳞状细胞癌是常见的恶性肿瘤,约占口腔恶性肿瘤的40%[1]。舌鳞状细胞癌恶性程度高,浸润性强,易发生淋巴结转移。目前,舌鳞状细胞癌的治疗主要采取以手术为主的综合治疗,但患者预后较差,5 年生存率低[2],因此,寻找用于治疗舌鳞状细胞癌的新药具有积极意义。茯苓酸(pachymic acid,PA)是中药茯苓的主要活性成分,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等功效[3]。近年来,茯苓酸的抗肿瘤作用备受关注。研究显示,茯苓酸可抑制肾癌、胃癌、膀胱癌等肿瘤中细胞增殖、迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡[4⁃6]。然而,茯苓酸在舌鳞状细胞癌的作用及其调控机制还未知。本研究以舌鳞状细胞癌CAL⁃27 细胞为研究对象,主要探讨了茯苓酸对CAL⁃27 细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响及。
1 材料与方法
1.1 细胞和试剂 茯苓酸,货号MR80187,纯度≥98%,20 mg/支,上海铭睿生物科技有限公司(准确称取0.529 mg茯苓酸于10 mL 量瓶中,加入10 μL 二甲基亚砜,茯苓酸溶解后超纯水定容至10 mL,配制为100 μmol/L 母液,使用时培养基稀释为所需浓度)。DMSO,国药编号30072418,国药集团化学试剂有限公司(取10 μL DMSO用超纯水定容至10 mL,配制1%DMSO 溶液,使用时用培养基稀释10 倍)。舌鳞状细胞癌细胞CAL⁃27,中国科学院上海细胞库;胎牛血清(FBS,批号20190510)、RPMI 1640 培养基(批号20190311)、膜联蛋白V(Annexin V)⁃异硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙啶(PI)细胞凋亡试剂盒(批号20190421)、细胞周期试剂盒(批号201900324)和二喹啉甲酸(BCA)蛋白检测试剂盒(批号20190329),北京索莱宝生物科技有限公司;四甲基噻唑蓝(MTT)和胰蛋白酶,美国Sigma 公司;……
