碳酸酐酶对猪链球菌生长及抗氧化应激的影响

2021-09-27陈琳王硕玥姚火春吴宗福

南京农业大学学报 2021年5期

关键词：生长

陈琳,王硕玥,姚火春,吴宗福

(南京农业大学动物医学院,江苏南京 210095)

猪链球菌(Streptococcussuis)是猪的重要细菌性病原,可引致猪的败血症、脑膜炎、心内膜炎、关节炎等症状,在全球范围内对养猪业造成重大的经济损失;猪链球菌还是重要的人畜共患病病原,可导致生猪从业人员感染或致病。猪链球菌血清型众多,根据不同荚膜多糖的抗原性,可分为29种传统血清型(1～19、21、23～25、27～31、1/2)、Chz血清型、26种新荚膜基因簇菌株(NCL1～26)及部分未定型菌株,其中血清2型对人和猪的致病性最强[1-5]。

本课题组前期通过比较蛋白组学方法发现,猪链球菌碳酸酐酶(S.suiscarbonic anhydrase,SCA)在H2O2处理组显著上调表达,提示其参与猪链球菌抗氧化应激[16]。通过NCBI序列比对,发现sca在至今已公布的67株猪链球菌全基因组中均有分布,但其在猪链球菌中的生物学功能及在致病中的作用未见报道。本试验构建sca无痕缺失株,比较野生株与缺失株在不同条件下的生长能力,以及通过H2O2应激、小鼠巨噬细胞RAW264.7吞噬与存活、猪全血存活等试验阐明其在猪链球菌抗氧化应激中的作用,为深入了解猪链球菌致病机制及防控该类疫病提供参考。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

THB培养基购自美国BD公司;绵羊血购自北京鼎国生物科技有限公司;DMEM(Dulbecco’s modified eagle medium)培养基购自美国Thermo Fisher Scientific公司;胎牛血清购自美国Gibco公司;2×Rapid Taq Master Mix、DNA片段回收试剂盒购自南京诺唯赞生物科技有限公司。