李秀萍，王 玲，王 馨，严晓芸，董 力

结核病是一种严重的传染病，由结核分枝杆菌感染引起，对人类健康构成了巨大威胁。有流行病学统计数据显示，近年来我国结核病病例显著增加[1]。有研究表明，结核分枝杆菌是一种细胞内病原体，可寄生于宿主巨噬细胞，通过调控炎症反应及吞噬体酸化、成熟等不同机制调节宿主细胞死亡[2]。巨噬细胞能够杀灭微生物，但结核分枝杆菌仍然能够克服巨噬细胞的杀微生物机制而存活并复制[3]。自噬促进受损细胞器和错误折叠蛋白质降解，在抗菌防御机制中起着关键作用。重要的是，自噬既可以调节宿主对分枝杆菌感染的抗性，又可以控制细胞的存活[4]。CC类趋化因子配体2(CCL2)是一种调节单核细胞和巨噬细胞向感染部位迁移和渗透的关键趋化因子，其水平与结核病严重程度相关[5]。有研究显示，CD44能够促进结核分枝杆菌感染巨噬细胞中CCL2的表达[6]。还有研究表明，CCL2参与调节角质形成细胞的自噬[7]。然而，现临床尚未确定CCL2对结核分枝杆菌感染巨噬细胞自噬的影响。因此，本研究探讨CCL2对结核分枝杆菌感染人单核巨噬细胞THP-1自噬的影响及分子机制，以期为结核病的防治提供实验基础。

1 材料与方法

1.1细胞株和主要试剂 结核分枝杆菌H37Rv株和人单核巨噬细胞THP-1(美国ATCC)；RPMI 1640培养基和青-链霉素双抗(美国HyClone)；胎牛血清(美国Gibco)；Lipofectmine 2000转染试剂(美国Invitrogen)；TRIzol试剂(北京索莱宝)；PrimeScript RT试剂盒和Green Premix Ex Taq Ⅱ(日本TaKaRa)；CCL2 siRNA和siRNA control(广州锐博生物)；CCL2、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、p62、p65、IKK-α和IκB-α单克隆抗体及辣根过氧化物酶标记的二抗(美国CST)；……