陈 琳 胡博森 周 波 陈 拥

1.沈阳医学院公共卫生学院，辽宁沈阳 110034；2.沈阳医学院附属中心医院骨科，辽宁沈阳 110024

骨质疏松症是常见的慢性病，伴有骨量及微结构系统性损伤，易引发脆性骨折。21 世纪以来，随着老龄化加剧，慢性病发病率逐年升高。骨质疏松症等慢性病已是全球性公共卫生问题[1]。矢车菊素-3-O-葡萄糖苷（cyanidin-3-O-glucoside，C3G）是花色苷最常见的形式[2-3]，因其具有抗氧化的作用，可对多种慢性病的防治产生积极效应，如糖尿病[4]、癌症[5]、神经系统疾病[6]和心血管疾病[7]等。研究显示[8-10]，花色苷可减缓骨质流失。亦有研究发现，C3G 能促进成骨细胞增殖分化，但机制尚未明确[11]。叉头盒蛋白O1（forkhead box O1，FOXO1）是成骨过程中的氧化调节因子，与成骨细胞活性关系密切[12]。c-Jun 氨基末端激酶（c-Jun Nterminal kinase，JNK）通路与骨质疏松有关，但调节方向不明。有研究显示，JNK/FOXO1 与氧化应激及成骨细胞增殖和分化有关[12-14]。本研究将探讨C3G 对人原代成骨细胞JNK/FOXO1的影响，及对转录激活因子-4（activiating transcripition factor-4，ATF4）和骨保护素（osteoprotegerin，OPG）mRNA 表达水平的影响，对以C3G 为主成分的骨质疏松类保健品开发提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

C3G（大连美仑生物技术有限公司，纯度>98%，批号：7084-24-4）；MTT 试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号：G020-1-1）；Trizol 试剂、反转录试剂盒、实时荧光定量PCR 试剂盒（日本TaKaRa 公司，批号：9108、RR037A、RR820A）。

细胞培养箱（BB-15，Thermo Fisher Scientific）；酶标仪（SpectraMax Plus 384，Moleclar Devices）；核酸分析仪（Nano，Thermo Fisher Scientific）；实时荧光定量PCR 仪（7500FAST，ABI）。

1.2 实验方法

1.2.1 人原代成骨细胞的分离与培养

本研究方案经学校伦理学委员会批准，患者均签署知情同意书。收集2017 年6 月至2018 年6 月沈阳医学院附属中心医院60～90 周岁的骨质疏松且股骨颈或股骨粗隆间骨折行人工股骨头或全髋置换患者的松质骨组织。将……