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LncRNA PRNCR1靶向miR-653-5p调控鼻咽癌细胞恶性生物学行为

2021-09-26赵黎阳崔玲张颖王玲李会政

中国癌症防治杂志 2021年4期
关键词:实验检测

赵黎阳 崔玲 张颖 王玲 李会政

鼻咽癌是常见的头颈部恶性肿瘤,其发病隐匿,且病情进展迅速,极大威胁人类生命健康[1-2]。目前,鼻咽癌的发病机制尚未明了。研究表明,鼻咽癌发生发展可能与原癌基因激活及抑癌基因失活有关[3]。因此,寻找影响鼻咽癌发生发展的基因分子,可能为鼻咽癌的治疗提供分子靶点。前列腺癌非编码RNA 1(prostate cancer non-coding RNA 1,PRNCRl)是一种前列腺癌相关基因,属于长链非编码RNA(lncRNA)家族成员。研究表明,PRNCRl可能通过调控雄性激素受体参与前列腺癌的发生,同时在舌鳞癌[4]、非小细胞肺癌[5]和乳腺癌[6]等肿瘤中呈高表达,并通过促进肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭,阻碍细胞凋亡,进而促进肿瘤发展进程。有研究报道,PRNCR1在鼻咽癌组织中呈高表达[7],但其对鼻咽癌细胞恶性表型的影响尚未见报道。lncRNA可通过竞争性结合微小RNA(miRNA)进而调控miRNA靶基因表达,参与调控肿瘤细胞恶性表型[8-10]。研究显示,miR-653-5p在胃癌[11]和宫颈癌[12]等肿瘤中发挥抑癌基因作用,上调其表达可阻碍肿瘤发展进程。本课题组通过Starbase靶基因软件预测显示,PRNCR1可能靶向结合miR-653-5p。在此基础上,本研究进一步检测鼻咽癌细胞系中PRNCR1和miR-653-5p的表达,探讨PRNCR1/miR-653-5p轴对鼻咽癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。

1 材料与方法

1.1 细胞系及主要试剂

鼻咽癌细胞系(5-8F、6-10B、C666-1)购自中国科学院上海细胞库;鼻咽上皮细胞NP69购自上海弘顺生物科技有限公司;RNA抽屉试剂盒、逆转录试剂盒和PCR试剂盒均购自大连宝生物工程有限公司;RPMI 1640培养基、CCK-8试剂盒、Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒和双荧光素酶活性检测试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司;……

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