邹海盯，罗伟

（中南大学湘雅二医院 麻醉科，湖南 长沙 410011）

0 引言

骨肉瘤患者化疗及手术是常用治疗方法，顺铂即顺式-二氯二氨合铂，属于细胞周期非特异性药物，作为一种细胞周期非特异性抑制剂，在骨肉瘤化疗中比较常用。而有研究表明，七氟醚可以增强肺腺癌A549细胞对顺铂化疗敏感性，其与MMP-2、MMP-9、Ezrin和Fascin蛋白表达变化有关[1]。而七氟醚、异氟醚作为骨肿瘤手术常规麻醉药物，其对骨肿瘤化疗敏感性的影响未见有相关文献报道。本研究拟在体外条件下研究七氟醚、异氟醚对骨肉瘤MG63化疗敏感性的影响及初步探索发挥作用可能机制。

1 资料与方法

1.1 一般资料。骨肉瘤MG63细胞株由第四军医大学唐都医院骨肿瘤研究所提供；顺铂（DDP）购自山东齐鲁制药厂；异氟醚（Isoflurane，Iso）购自鲁南贝特制药有限公司；七氟醚（Sevflurane，Sev）购自美国Baxter公司；DMEM培养基购自美国Hyclone公司；胎牛血清购自浙江天杭生物科技有限公司；胰酶细胞消化液购自碧云天生物技术有限公司；MTT、Annexin V-FITC凋亡试剂盒、二甲基亚砜（DMSO）、PS（青霉素+链霉素）自西安国安生物科技有限公司；七氟醚、异氟醚吸入式动物麻醉机购自上海瑞曼信息科技有限公司；96孔板、培养瓶、6孔板、培养皿购自美国COSTAR公司；麻醉气体监测仪购自荷兰Philips公司，流式细胞仪购自美国BD公司；连续波长酶标仪购自瑞士帝肯公司；密闭有机玻璃箱；BCA蛋白定量试剂盒购自北京康为世纪生物科技有限公司；RIPA裂解液购自西安晶彩生物科技有限公司；免抗Bcl-2、兔抗Bax购自英国Abcam公司。

1.2 方法

1.2.1 细胞的培养：将骨肉瘤MG63细胞移至培养瓶中，添加5 mL含10%胎牛血清的培养基，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养，每隔2～3 d传代一次，1∶2传代。……