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姜黄素联合TRAIL诱导人卵巢癌细胞的凋亡及其相关机制

2021-09-25曾祚萍李佳慧崔君泽杨淑莉

中国实验诊断学 2021年9期

王 敏,曾祚萍,李佳慧,崔君泽,杨淑莉

(吉林大学第二医院 妇产科,吉林 长春130041)

卵巢癌可发生在任何年龄段,50岁以上女性为主要发病群体,通常发现即为晚期,预后较差[1]。卵巢癌患者在持续化疗过程中机体会出现耐药,并且耐药程度会逐渐增加[2]。TRAIL作为TNF相关凋亡的诱导配体,其自身不具明显毒性,TRAIL能上调DR4、DR5的表达从而发挥杀灭肿瘤细胞的作用[3]。姜黄植物根茎的姜黄素经相关研究显示其抗氧化、抗癌及抗炎症方面具有显著优势,如配合其他药物联用可能发挥抗癌功效,促进癌细胞凋亡[4-5]。本文探讨姜黄素联合TRAIL诱导人卵巢癌细胞的凋亡及其相关机制,报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料SKOV-3和OVCAR-3细胞株由吉林大学第二医院实验室提供,重组人TRAIL蛋白购自美国RD公司,MTT、DMSO自美国Sigma公司购入,美国Hyclone公司的RPMI1640培养基,细胞凋亡检测试剂盒美国BD公司购置,Caspase活性检测试剂盒由江苏碧云天生物技术研究所支持,酶标仪为美国雷勃公司Thermo Multiskan MK3,流式细胞仪采用美国BD公司Accuri。

1.2 方法

1.2.1细胞复苏、培养、传代及冻存 将冻存管从-150℃超低温冰箱中取出置于37℃水浴箱中,自主晃动使其融化,将细胞悬液放入离心管。将SKOV-3和OVCAR-3细胞株分别置于5 ml含10%新生牛血清RPMI1640培养基,打碎均匀后经800 rpm离心,弃上清,于细胞培养瓶中接种后置于37℃、5%CO2条件下培养,至80%-90%细胞贴壁覆盖进行传代,将旧培养液弃除,并用PBS缓冲液冲洗细胞,在1 ml 0.25%胰酶条件下镜下观察,当细胞质圆润、回缩时加入10%新生牛血清2 ml培养基。将贴壁细胞予以离心处理,按1∶2比例将沉淀白色细胞接种至新培养瓶,置于37℃、5%CO2条件继续培养。……

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