张燕星，吕浩北，黄冬梅，赵志国★，陈盟

（1.承德医学院，河北 承德；2.承德市中心医院，河北 承德）

0 引言

随着经济水平的进步，各种新兴医疗技术在提高治愈率的同时，院内感染的风险也在逐步上升[1]，医院呼吸内科感染率较高，治疗周期长，临床抗菌药物使用难度大，因此及时准确的病原菌鉴定及同源性分析对临床优化抗菌药物至关重要。本研究通过收集2020年11月至2021年3月呼吸内科住院患者检出的病原菌，监测其分布及同源性，旨在发现耐药菌株的传播情况，为临床合理用药提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源

选取2020年11月至2021年3月我院呼吸内科住院患者分离病原菌，剔除同一患者分离的重复菌株，获得目的菌株89株。

1.1.2 仪器与试剂

VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定及药敏分析系统，VITEK MS全自动快速微生物质谱检测系统，基质液：VITEK MS-CHCA；培养基（郑州安图生物）；质控菌株：大肠埃希菌ATCC 8739、ATCC 25922（卫生部临检中心）。

1.2 实验方法

1.2.1 耐药检测

按照《全国临床检验操作规程》进行实验，采用VITEK MS RUO模式鉴定病原菌，药敏试验采用MIC或K-B法，按照美国临床实验室标准化研究所最新标准进行药敏结果判定（CLSI M100-ED29）。

1.2.2 质谱鉴定及同源性分析

接种环挑取单个菌落，均匀涂在靶板上，立刻加1 μL的CHCA基质液，干燥后应用VITEK MS RUO模式对目的菌株进行鉴定，利用SARAMIS软件分析其同源性。

1.2.3 病原体耐药表型

对CRKP行mCIM和eCIM实验。mCIM：取待测菌株1 μL接种TSB肉汤试管中，涡旋15 s，放入10 μg美罗培南纸片，35 ℃孵育4 h，取出纸片放入ATCC 25922涂布的MH培养基上，35 ℃孵育18 h，量取抑菌圈直径。eCIM：于TSB肉汤试管加0.5 M EDTA20 μL，其余步骤与eCIM一致。……