董晓茜，鄢长余，于远洋

（1 辽宁省中医药研究院，辽宁 沈阳；2 大连市检验检测认证技术服务中心，辽宁 大连）

0 引言

心可舒胶囊是由丹参、葛根、三七、山楂、木香五味药材制成的复方制剂，具有活血化瘀、行气止痛的作用。在临床中，经常用于治疗气滞血瘀型冠心病引起的胸闷、头痛、高血脂等症[1]。该制剂现行质量标准收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第二册，仅有性状、木香和丹参的薄层鉴别项，无法很好的控制其投料的药材质量。因此本实验参考中国药典《2015》年版一部[2]木香项下及其相关文献[3-6]对木香中的指标性成分木香烃内酯和去氢木香内酯建立了含量测定方法。结果表明该方法可以对木香的药材质量进行控制。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Waters2489/2695 液相色谱仪；Sartorius BP211D、SartoriusBP221S 电子天平。

1.2 试剂与试药

木香烃内酯（111524-201509 99.0%）和去氢木香内酯（111525-201912 99.5%）对照品均来自中国食品药品检定研究院；甲醇为色谱纯，水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 含量测定

2.1.1 色谱条件

采用Agilent Extend-C18（4.6mm×250mm，5μm）色谱柱，以甲醇-水(65 ∶35)；检测波长:225nm；流速:1.0ml/min；柱温:30℃。

2.1.2 溶液的制备

2.1.2.1 对照品溶液

精密称取木香烃内酯和去氢木香内酯对照品，加甲醇制成每1ml 含20μg 的溶液。

2.1.2.2 供试品溶液

取本品内容物，研细，混匀，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理40min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.1.2.3 阴性样品溶液

取缺木香的阴性样品，按“2.1.2.2”项下的方法制备阴性样品溶液并进行测定，记录色谱图，结果阴性无干扰。

2.2 方法学验证

2.2.1 线性范围的考察

精密吸取木香烃内酯和去氢木香内酯对照品溶液，分别制成每1ml 含5μg、10μg、20μg、40μg、80μg、100μg 的溶液。在上述色谱条件下分别进样测定。以质量浓度（X，mg/ml）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标，绘制标准曲线，得木香烃内酯和去氢木香内酯的回归方程分别为Y=584113026X-1915（R2=0.9999）和Y=408213776X-2033（R2=0.9999），分别在0.05-0.99μg 和0.05-1.02μg(R2=0.9999)范围内线性良好。

2.2.2 精密度考察

取同一供试品溶液连续进样6 次，测得木香烃内酯和去氢木香内酯峰面积的RSD 分别为0.5%和0.8%。结果表明，仪器精密度良好。

2.2.3 稳定性考察

取同一供试品溶液，分别于0h、2h、4h、6h、12h、24h 进样测定。结果显示木香烃内酯峰面积的RSD 为0.6%、去氢木香内酯峰面积的RSD 为0.2%。表明供试品溶液中两种物质均在24h 内稳定性良好。

2.2.4 重复性考察

取同一批供试品，平行制备6 份供试品溶液，测定，记录各组分色谱峰面积。木香烃内酯和去氢木香内酯含量测定结果的RSD 分别为0.2%和0.3%。

2.2.5 加样回收率试验

取已知含量的心可舒胶囊约0.25g，精密称定，共9 份，分别加入木香烃内酯和去氢木香内酯对照品母液1ml、2ml、3ml，按“2.1.2.2”项下方法制备供试品溶液，测定，计算加样回收率(表1、表2)。木香烃内酯和去氢木香内酯的平均回收率(n=9)分别为98.8%和99.5%，RSD 分别为1.5%和1.4%。

表1 木香烃内酯加样回收率试验结果(n=9)

表2 去氢木香内酯样回收率试验结果(n=9)

3 讨论

（1）本实验为了兼顾木香烃内酯和去氢木香内酯的热不稳定性，选择了超声处理提取方式[7-10]。比较了无水乙醇、甲醇、70%甲醇作为提取溶剂，结果表明甲醇提取效率较高，并考察提取溶剂的体积和超声时间，根据测定结果，最终选择甲醇溶液50ml 超声处理40min 作为供试品溶液的提取方法。

（2）参考文献[2]中木香含量测定项下的流动相，并查阅了相关文献[11-13]，对甲醇-水和甲醇-0.1%磷酸溶液等系统进行了研究，结果表明酸的加入对两种对照品的峰形、分离度、出峰时间等并无明显区别，故而选择甲醇-水流动相系统。