朱紫衣

(简阳市人民医院实验医学科，四川 简阳 641400)

0 引言

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是最常见的原发性肝脏恶性肿瘤。大多数HCC病例在晚期才确诊，治疗选择有限，目前HCC患者的5年总生存率(OS)仅为3%~5%，严重危害人类生命健康[1]。早期诊断和治疗HCC是提高患者生存率，改善预后的关键。甲胎蛋白(Alphafetoprotein，AFP)是目前临床上首选的HCC血清学诊断指标，但部分HCC患者血清AFP水平并不明显增高，同时部分良性肝脏病变，如肝炎、肝硬化也可引起血清AFP水平增高，因此单纯应用AFP诊断HCC具有一定的局限性。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是促进血管形成和参与肿瘤侵袭转移的重要因子，多项研究报道VEGF与多种肿瘤发展、浸润、转移紧密相关[2]。基于HCC具有高血管密度的特点，因此本研究通过分析HCC患者外周血VEGF、AFP的表达特点，探讨联合检测二者水平在原发性肝癌中的诊断价值，为HCC的防治提供帮助。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选取2018年1月1日至2019年12月30日首诊于简阳市人民医院的HCC患者为肝癌组(n=150例)，肝硬化患者为肝硬化组(n=150例)，同期的健康体检者为对照组(n=150例)。入组标准严格按照原发性肝癌诊疗规范(2019年版)。具体入组标准如下：(1)患者临床表现、影像学资料符合HCC诊断标准，并通过病理活检证实；(2)患者病历资料完整；(3)尚未接受过相关治疗的初诊患者。排除标准：(1)合并其他严重心脑血管疾病患者；(2)2 w内服用其他药物影响检测指标者；(3)合并其他恶性肿瘤者；(4)合并其他免疫系统疾病者。其中肝癌组男性95例，女性55例，平均年龄(59.23±10.88)岁；肝硬化组男性90例，女性60例，平均年龄(58.05±11.49)岁；对照组男性94例，女性56例，平均年龄(59.45±15.02)岁。三组基础资料比较无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 仪器与试剂

均在患者入院后第2天早晨抽取空腹外周静脉血3-4 mL，室温静置30 min，3500 r/min 离心 10 min，收集血清待检。采用罗氏的电化学发光仪测定血清 AFP，试剂由罗氏诊断产品有限公司提供；采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清VEGF，试剂由上海恒生生物公司提供。检测均由专人严格按照试剂说明书进行。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 3组VEGF、AFP水平比较

原发性肝癌组、肝硬化组、健康对照组血清AFP水平分别为(934.25±80.01)ng/L、(37.25±9.66)ng/L、(4.14±2.51)ng/L；三组血清VEGF水平分别为(364.97±43.62)ng/L、(201.94±14.53)ng/L、(90.53±21.74)ng/L。原发性肝癌组血清AFP、VEGF水平明显高于肝硬化组和健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，详见表1。

表1 三组血清AFP、VEGF水平情况(ng/L)

2.2 血清VEGF、AFP对HCC的诊断价值分析

经ROC曲线分析，AFP诊断原发性肝癌的AUC为0.853(95%CI 0.874~0.932，P=0.000)、VEGF 诊 断 HCC 的 AUC为 0.627(95%CI 0.576~0.679，P=0.000)，AFP+VEGF 联合诊断原发性肝癌的AUC为0.903(95%CI 0.894~0.974，P=0.000)。同时诊断灵敏度和特异度均高于单项检测(P<0.05)，详见表2。

表2 血清VEGF联合AFP对HCC的诊断价值分析

3 讨论

肝癌是一种高度恶性且预后差的肿瘤，是全球癌症相关死亡的主要原因之一[3]。目前世界范围内发生的大多数肝癌(70% ~ 90%)是肝细胞癌(HCC)。肝癌的发生因素有许多，包括酗酒、黄曲霉毒素和乙型肝炎病毒(HBV)、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)和丙型肝炎病毒(HCV)感染等[4]。我国肝癌年发病率为37万(27.29/10万)，死亡率为31万(23.76/10万)，且发病率呈逐年上升趋势，严重危害我国群众的生命健康[5]。肝癌患者即使经过手术切除或肝移植，其预后仍不理想，早期诊断和治疗是提高患者生存期、改善预后的关键。目前AFP是诊断和评价HCC临床结局最常用的生物标志物之一，但由于AFP在胃癌、胰腺癌等其他多种肿瘤中也会表达增高[6]，肝细胞炎症、肝硬化时血清AFP水平也会增高，因此对于AFP诊断肝癌的灵敏度和特异性仍有争议。目前，有研究尝试对AFP和其他血清标志物进行联合检测，探讨联合检测分析是否能提高AFP在HCC中的诊断和预后价值。郁淼等研究表明联合检测血清 AFP、GP73、AFU、SF 可以提高HCC的诊断灵敏度[7]；程卫英等研究表明联合检测血清CEA、AFP有助于提高HCC诊断效能[8]；李洪波等发现联合检测血清 AFP-L3、PIVKA-II和CEA，可以缩短原发性肝癌的检出时间，提高诊断准确率[9]。因此联合检测多个指标对于提高HCC的诊断效能是具有临床应用价值的。

VEGF是一种肝素结合蛋白，可诱导血管内皮细胞的增殖和迁移，对生理和病理血管生成都至关重要。从肝损伤进展到炎症、肝硬化、肝癌，VEGF通过提供代谢所需的营养物质和氧气，刺激血管生成，激活内皮细胞，破坏肝脏血管构架，在病理血管的形成过程中发挥了重要作用[10]。功能富集研究发现VEGF通过参与调节细胞增殖、细胞周期、凋亡来影响肿瘤细胞的基本状态。临床研究表明血清高VEGF水平与肝癌患者的分期和预后相关[11]。HCC患者术前高血清VEGF水平与较短的总生存期(OS)和无病生存期(DFS)相关。胡燕红等研究发现肝癌患者血清VEGF水平明显高于良性肝病患者和健康志愿者，同时联合检测TK1、VEGF、AFP表达水平可提高HCC诊断灵敏度[12]。本研究发现HCC患者血清VEGF、AFP水平明显高于肝硬化组、健康对照组，同时联合检测VEGF、AFP水平明显提高了HCC的诊断灵敏度和特异度。所得结果与既往报道相吻合。

近年来，恶性肿瘤的分子标志物为临床诊断和治疗提供了极大帮助。血清肿瘤标志物是肿瘤细胞内异常表达，参与肿瘤发生、发展的一类物质，临床常应用肿瘤相关标志物对多种肿瘤进行诊断、治疗、病情评估以及预后判定。肿瘤标志物检验方法简单，可操作性强，在早期筛查和诊断肿瘤方面有较好的前景[13]。本研究经ROC曲线分析提示联合检测血清AFP、VEGF有助于HCC的临床诊断。这提示对于高度怀疑肝癌的患者，联合检测血清AFP和VEGF是有一定的临床应用价值的。然而单纯检测肿瘤标志物，也有一定的局限性。比如血清AFP、VEGF水平不能较为直观的反映肿瘤的大小和肿瘤的准确分期，因此还需联合病理结果，综合判定。

综上所述，HCC患者血清VEGF、AFP水平呈高表达，联合检测血清VEGF、AFP水平对HCC的早期诊断有重要的临床价值。