杨 天， 吴明亮， 张国海

（达州市中西医结合医院泌尿外科，达州 635000）

膀胱癌（bladder cancer，BC）是世界九大恶性肿瘤之一，不同的年龄、性别、种族及地域其发病率存在较大差异[1]。低级别非肌肉侵袭性膀胱癌（nonmuscle invasive bladder cancer，NMIBC）约占全部BC 患者的75%，其中15%～20%的患者将会进展为肌肉侵袭性膀胱癌（muscle invasive bladder cancer，MIBCS），由于 MIBCS 基本上会发生转移，患者预后较差，5 年存活率＜50%[2]。因此，发现和研究BC 患者肿瘤侵袭和转移的分子机制对临床药物靶点治疗有十分重要的意义。Wnt 信号通路在肿瘤的发生、发展、侵袭、转移中具有重要的调控作用[3]。Wnt7a 是Wnt 信号家族成员中的一种分泌性糖蛋白，在多种癌症中均有表达。此外，Wnt7a与肺癌[4]、结肠癌[5]、肾癌[6]及卵巢癌[7]等肿瘤的转移有关，但其在BC 中与癌细胞侵袭有关的报道尚不多见。基质金属蛋白酶10（MMP-10）是基质金属蛋白酶的一种，在肿瘤的侵袭和发展中发挥重要作用[8]，MMP-10作为Wnt 信号通路的下游基因，其在BC 肿瘤细胞侵袭中的作用尚未见报道。因此在本实验中，将初步检测Wnt7a 在高侵袭性BC 细胞（5637 HUBC）中的表达，分析其与MMP-10 的相关性，探讨Wnt7a 在侵袭性BC 中的调控机制，可能为侵袭性BC 的治疗提供新的方向。

1 材料与方法

1.1 一般资料

5637 HUBC 和对照低侵袭性BC 细胞（5637 NUBC）均购自中国科学院上海细胞库，人BC 组织来自本院；RPMI-1640 培养基购自美国Life Technologies 公司，标准胎牛血清购自德国Capricorn Scientific 公司；Transwell 六孔板购自美国Corning 公司；人源重组Wnt7a 蛋白购自美国Pepro Tech 公司；Lipofectamine 2000 购自美国 Invitrogen 公司，Matrigel 基质胶购自美国 BD Biosciences 公司；phosphatase inhibitor tablet 购自罗氏公司，protease inhibitor tablet 购自罗氏公司；TanonTMHigh-sig ECL Western Blotting Substrate购自上海天能有限公司；Fastagen 200 总RNA 快速抽提试剂盒购自上海飞捷生物技术有限公司；……