郑越男 曹进 孙珊珊 郭亚辉 罗娇依 钱和

摘要 [目的]评定液相色谱-串联质谱法测定三文鱼中生物胺的不确定度。[方法]样品经过5%三氯乙酸提取、正己烷除脂、丹磺酰氯丙酮溶液衍生化后，液相色谱-串联质谱分析三文鱼中9种生物胺的含量，对方法相对标准不确定度、标准不确定度、扩展不确定度进行评估。[结果]色胺、β-苯乙胺、腐胺、尸胺、酪胺、组胺、精胺、亚精胺、去甲基肾上腺素的平均值分别为4.30、5.59、5.72、6.21、4.85、5.48、7.18、6.79、4.77 mg/kg，扩展不确定度分别为0.46、0.56、0.48、0.54、0.42、0.50、0.64、0.55、0.41 mg/kg（k=2）。[结论]标准储备液的配制、稀释以及标准曲线的线性拟合对不确定度的贡献值最大，建议选用精度好的量器，规范试验操作与前处理步骤。

关键词 三文鱼;生物胺;液相色谱-串联质谱;不确定度

中图分类号 TS254.7 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2021）17-0189-06

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.17.050

Abstract [Objective]To evaluate the uncertainty of determination of biogenic amines in salmon by liquid chromatography tandem mass spectrometry.[Method]The samples were extracted with 5% trichloroacetic acid， defatted with n-hexane and derivatized with dansyl chloroacetone solution. The contents of 9 biogenic amines in salmon were analyzed by LC-MS/MS.The relative standard uncertainty， standard uncertainty and expanded uncertainty of the method were evaluated.[Result]The average values of tryptamine， β - phenylethylamine， putrescine， cadaverine， tyramine， histamine， spermine， spermidine and norepinephrine were 4.30， 5.59， 5.72， 6.21， 4.85， 5.48， 7.18， 6.79 and 4.77 mg/kg respectively， and the expanded uncertainty was 0.46， 0.56， 0.48， 0.54， 0.42， 0.50， 0.64， 0.55and 0.41 mg/kg respectively （k=2）.[Conclusion]The preparation and dilution of standard stock solution and the linear fitting of standard curve have the greatest contribution to the uncertainty. It is suggested to select a measuring instrument with good accuracy and standardize the experimental operation and pretreatment steps.

Key words Salmon;Biogenic amine;Liquid chromatography tandem mass spectrometry;Uncertainty

三文鱼是鲑科鱼，主要分布在大西洋、太平洋和欧洲北极的海岸[1]。三文鱼味道鲜美、营养丰富，不饱和脂肪酸（DHA、EPA、DPA）、蛋白质及维生素等含量丰富[2]，有助于儿童智力发育、预防心血管疾病、降低癌症发病率等[3]。我国冰鲜三文鱼进口量逐年增加，三文鱼消费市场庞大[4]。但是在贮存运输过程中，三文鱼肌肉组织在微生物的作用下，极易发生蛋白质的分解、腐败变质，产生生物胺等有毒代谢物[5]。生物胺是极性或半极性化合物的氮化有机碱，根据其结构差异，可以分为3类：脂肪族生物胺（如腐胺、尸胺、亚精胺、精胺、胍基丁胺等[6-7]）、芳香族生物胺（如酪胺、苯乙胺、苯甲胺等[8]）、杂环胺（如组胺、色胺、5-羟色胺等[9]）。

目前多种方法用于测定食品中的生物胺，如液相色谱-串联质谱[10]、高效液相色谱[11]、薄层色谱[12]、毛细管电泳[13]、气相色谱、气相色谱-串联质谱[14]、生物传感器[15]和ELISA[16]等。……