李百齐，许伟，李萍，高丽，宋琦，张庭婷

1.遵义医科大学口腔医学，贵州 遵义 563099；2.遵义医科大学附属口腔医院病理科，贵州 遵义 563099；3.遵义医科大学附属口腔医院牙周科，贵州 遵义 563099

在牙周病与心血管疾病(cardiovascular disease，CVD)相关性研究中，关于牙周病原菌的研究较为常见，尤其是牙周病原菌与内皮细胞之间的关系，一直是研究的重要内容之一。牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis，P.gingivalis)是一种重要的慢性牙周炎致病菌，内毒素脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)被认为是其中最重要的一种毒力因素[1]，通常可以间接促进CVD的发生和发展。

作为核转录因子家族的一员，核因子-κB(nuclear factor kappa B，NF-κB)一般存在于细胞浆内，其具有各类基因转录调控功能。这种因子通过某些信号通路参与人体内细胞的感染、免疫、炎症反应等的发生[2]，当它从胞浆转位进入胞核内时，能够通过合成炎症反应因子，进而导致机体产生炎症反应[3]。茶多酚(tea polyphenols，TP)是茶叶中多羟基酚类化合物的复合物，具有抗炎、抗氧化等生物活性，为茶叶保健功能的主要化学成分[4]。但TP抗炎作用机制是否与NF-κB有关目前鲜少报道。本实验主要观测不同浓度TP 对Pg-LPS诱导的HUVECs中NF-κB p65表达影响，进而探讨TP对血管内皮细胞的调节及可能的作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂 Pg-LPS(InvivoGen 公司)、TP(陆圣康源科技公司)、0.25%胰蛋白酶(Hyclone公司)、细胞裂解液、核蛋白抽提试剂盒、SDS-PAGE蛋白上样缓冲液、BCA 蛋白浓度测定试剂盒(索莱宝公司)、NF-κB p65多克隆抗体(Abcam公司)等。

1.2 方法

1.2.1 HUVECs 的培养及鉴定 获得遵义医科大学附属医院伦理委员会的批准同意后，笔者按照医院伦理委员会标准操作规程完成取材与细胞培养。……