罗秋红，施光亚，高 勇，刘雅萍，张 洁

（福建中医药大学附属人民医院，福建 福州350004）

肠易激综合征（irritable bowel syndrome，IBS）是常见的胃肠功能性紊乱疾病，临床上以腹泻型多见，因其病程漫长，且容易反复发作，治疗效果较差，使患者的生活质量及精神状态均受到不同程度的影响，曾被归属于心理疾病范畴［1-2］。腹泻型肠易激综合征（diarrhea irritable bowel syndrome，IBS-D）的病因和发病机制尚不明确，目前国内外专家普遍认为与胃肠道动力异常、内脏高敏感性、脑－肠轴调节功能紊乱、免疫异常、肠道菌群失调、小肠通透性增加等有关［3-4］，而肠动力异常是IBS-D的主要病理基础。目前对IBS-D的治疗，西医治疗上尚缺乏行之有效的治疗手段［5］，相对而言，中医治疗优势独特，能降低本病复发率，且毒副作用较小［6］。藿砂口服液是福建中医药大学附属人民医院的院内制剂，早期的临床及基础研究发现：藿砂口服液对各种急、慢性腹泻均具有很好的止泻效果［7-9］，但具体作用机制不明确。本研究通过观察藿砂口服液对IBS-D大鼠神经递质以及肠动力的影响，进一步探讨藿砂口服液调节肠功能紊乱的作用机制。

1 材 料

1.1 动物 SPF级Wistar大鼠100只，体质量（200±10）g，雌雄各半，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，许可证号：SCXK（沪）2017-0005，饲养于福建中医药大学动物实验中心SPF级动物房，Wistar大鼠适应性饲养5 d后用于实验。

1.2 仪器 高速冷冻离心机（安徽中科中佳仪器有限公司，型号：HC-3018R）；雪花制冰机（常熟雪科电器有限公司，型号：IMS-30）；微型个人离心机、旋涡混合器（其林贝尔仪器制造有限公司，型号：LX-600、VORTEX-6）；MD酶标分析仪（美国Molecular Devices公司，型号：CMAX plus）；全自动洗板机（深圳湃尔生物科技有限公司，型号：PR510）；生化培养箱（上海一恒科学仪器有限公司，型号：LRH-150）

1.3 药品与试剂 藿砂口服液（院内制剂，批准文号：闽药制字Z06106047，批号：20080612）；大黄水煎剂（本院中药房提供，浓度：0.1 g／mL）；10%水合氯醛（本院药房提供，批准文号：H06106016，批号：190515）；生理盐水（福州海王福药制药有限公司，批准文号：H35020291，规格：250 mL／袋）；10%活性炭末悬液（炭末1 g溶于10 mL生理盐水）；一氧化氮（NO）试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号：A012-1）；5－羟色胺（5-HT）试剂盒（武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司，批号：E-EL-0033c）。

2 方 法

2.1 分组、造模及药物干预 将100只Wister大鼠按随机数字表法分空白组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组，每组20只。造模方法参照文献［10］稍作修改，模型组每日同一时间用0.1 g／mL常温大黄水煎剂2 mL灌胃1次，5 min后使用规格统一的橡皮筋将大鼠四肢末端、胸腹部固定于10 cm×20 cm的木板上，大鼠仰面向上，限制大鼠活动，木板靠墙壁直立90°放置，持续2 h，2 h后解除束缚，每天1次，连续6 d，建立IBS-D模型大鼠。低、中、高剂量组在造模同时，每日分别予低、中、高剂量藿砂口服液灌胃1次，连续6 d。藿砂口服液成人常规给药量为10 mL／60 kg，参照文献［11］换算大鼠的给药量，相当于人体剂量的6.3倍，低、中、高剂量分别为0.091、0.182、0.364 g／kg。空白组不予造模及药物干预。

2.2 大鼠一般情况 干预期间每天观察各组大鼠的排便、饮食、活动情况。

2.3 血清一氧化氮（NO）及5－羟色胺（5-HT）的测定 干预后第1天每组取10只大鼠，通过股动脉取血1 mL于干燥试管中，室温静置15 min后，3 000 r／min离心15 min，取上清液0.2 mL，-20℃保存待检测。NO检测采用氧化还原法，操作步骤严格按照NO试剂盒说明书；5-TH检测采用酶联免疫吸附法，操作步骤严格按照5-TH试剂盒说明书。

2.4 炭末推进试验 参照文献［12］，干预后第2天每组取10只大鼠进行炭末推进试验，计算小肠推进率。实验前每组大鼠禁食12 h，不限制饮水，用10%活性炭末悬液给5组大鼠灌胃，每只3 mL；20 min后用颈椎脱臼法处死动物，立即解剖，取出自幽门至末端的全部肠管，平铺在白色滤纸上，在无张力状态下测量炭末前沿至幽门的距离和小肠的全长，最后计算小肠推进率。

小肠推进率／%＝炭末前沿至幽门的距离／小肠的全长×100%

2.5 结肠转运功能测定 参照文献［13］，干预后第3天每组取剩余10只大鼠进行结肠转运功能测定。实验前每组大鼠禁食12 h，不限制饮水，用水合氯醛腹腔注射麻醉，取直径3 mm玻璃小球放入大鼠距肛门3 cm直肠内，待大鼠苏醒后开始计时，记录直肠内玻璃小球排出的时间。

2.6 统计学方法 采用SPSS 27.0统计软件处理数据。计量资料符合正态分布以（±s）表示，两组间比较采用t检验，多组间比较符合正态分布采用单因素方差分析检验，不符合正态分布采用非参数检验。

3 结 果

3.1 各组大鼠一般情况 空白组大鼠的大便性状基本为粒状、质软，食欲正常，动作灵活，精神饱满，被毛光泽；模型组，低、中、高剂量组大鼠在干预第4天开始均出现不同程度的腹泻，表现为糊状、不成形、水样大便或肛周污秽；干预结束后模型组大鼠表现为腹泻，纳呆，消瘦明显，精神倦怠，活动量明显减少，被毛稀疏或无光泽；而低、中、高剂量组大鼠腹泻改善，食欲量接近正常，消瘦不明显，精神稍差，被毛欠润泽，但和模型组比较有明显改善。

3.2 各组大鼠血清NO及5-HT含量比较 见表1。

表1 各组大鼠血清NO及5-HT含量比较（±s）μmol／L

表1 各组大鼠血清NO及5-HT含量比较（±s）μmol／L

注：与空白组比较，1）P＜0.01；与模型组比较，2）P＜0.05。

NO 40.85±10.19 25.73±4.871）33.36±8.242）36.56±6.352）37.78±5.972）组别空白组模型组低剂量组中剂量组高剂量组n 10 10 10 10 10 5-TH 190.84±67.61 277.94±35.811）253.53±69.972）227.80±51.952）204.95±22.672）

3.3 各组小肠推进率及玻璃小球排出时间比较见表2。

表2 各组小肠推进率及玻璃小球排出时间比较（±s）

表2 各组小肠推进率及玻璃小球排出时间比较（±s）

注：与空白组比较，1）P＜0.01；与模型组比较，2）P＜0.05。

组别空白组模型组低剂量组中剂量组高剂量组玻璃小球排出时间／min 12.20±2.10 5.90±1.201）8.40±0.972）9.60±1.352）11.6±1.782）n 10 10 10 10 10小肠推进率／%62.76±1.59 72.50±3.511）67.72±5.612）65.58±4.002）63.70±3.092）

4 讨 论

IBS-D是一种慢性或反复发作的功能性肠病，其发病基础与肠动力异常有关。IBS-D患者可以发生不同形式的肠动力功能紊乱，部位涉及小肠、结肠及直肠。肠动力功能紊乱可表现为小肠分阶段运动和移行性复合运动的频率和持续时间增加，十二指肠、空肠的逆行收缩减少，结肠高幅度推进运动增多。针对IBS-D的治疗，西医大都以对症治疗为主，中医药在改善IBS-D症状及防治方面具有很好的优势，但目前对IBS-D疗效机制方面的研究相对较少。

根据临床表现，IBS-D属于中医学“泄泻”范畴。《素问》记载“湿盛则濡泄”“脾病者……虚则腹满肠鸣，飧泄食不化”，《医宗必读》认为“无湿不成泻”，中医学认为泄泻的基本病机为脾虚与湿盛。藿砂口服液由藿香9 g，砂仁6 g，苍术9 g，陈皮6 g，泽泻12 g，厚朴9 g，神曲12 g，茯苓12 g，甘草6 g组成，全方具有健脾和胃、除湿止泻的功效。本研究中与空白组比较，模型组大鼠腹泻、消瘦明显，活动量减少，小肠推进率明显加快，玻璃小球排出时间明显缩短，说明模型组造模成功；与模型组比较，低、中、高剂量组大鼠腹泻症状改善，消瘦较不明显，活动灵活，小肠推进率均减慢，玻璃小球排出时间均延长，说明藿砂口服液可减缓小肠的推进运动，降低结肠转运速度。

NO、5-TH是参与调节胃肠道动力功能的重要神经递质。NO参与胃肠平滑肌的松弛作用，在胃肠道蠕动反射中产生下行性抑制作用，是胃肠道非肾上腺素能神经的抑制性递质。5-TH既是神经递质也是胃肠激素，在调整肠道运动方面也具有重要作用。5-HT可引起小肠蠕动增强，推进速度加快，移行性综合运动增多，张力提高。5-TH含量的增加会导致大便次数增多，粪便性状改变，从而出现腹泻。本研究中与空白组比较，模型组血清NO含量下降，5-TH含量增加；与模型组比较，低、中、高剂量组血清NO含量均升高，5-TH均下降，说明藿砂口服液可提高大鼠血清NO的含量，降低5-TH的含量。表明藿砂口服液可调节血清NO及5-TH含量，起到止泻作用。

综上所述，藿砂口服液可减缓小肠的过快推进运动，降低结肠转运速度，调节大鼠血清NO、5-TH的含量，但更深的调节机制有待于进一步深入研究。