祁小丽， 王玉婷， 杨 杰

(新疆乌鲁木齐市新疆维吾尔自治区人民医院放疗二科， 新疆 乌鲁木齐 830001)

宫颈癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率均较高。目前，临床上对中晚期宫颈癌主要是放射治疗，治疗早期能够取得较好的疗效，但后期随着放疗剂量的累积，可出现宫颈癌细胞对放疗敏感性降低的现象，影响治疗效果与预后[1]。Xklp2靶蛋白(targeting protein for Xklp2，TPX2)与细胞周期进展密切相关，可有效调控细胞周期相关蛋白，在维持有丝分裂稳态的过程中起着重要作用[2]。TPX2在多种恶性肿瘤疾病中存在高表达的现象，该表达与细胞的异质性具有较高的相关性[3]。本研究旨在通过沉默宫颈癌细胞的TPX2基因探讨其对宫颈癌细胞活性及放疗敏感性的影响。

1 资料与方法

1.1细胞、试剂及仪器：宫颈癌细胞(Hela细胞系)购自上海弘顺生物科技有限公司，质粒载体来源于上海柯雷生物科技有限公司，逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)试剂盒、cDNA逆转录试剂盒来源于杭州弗德生物科技有限公司，蛋白质印迹法(Western Blot)试剂盒来源于苏州泓迅生物科技有限公司，TPX2的兔抗人抗体、羊抗兔抗体来源于南京霆瑞生物科技有限公司，Transwell小室来源于山东维真生物科技有限公司，CCK-8试剂盒来源于广州鼎国生物技术有限公司，细胞培养箱、培养液来源于美国康宁生物科技有限公司，聚合酶链反应(PCR)仪来源于美国应用生物系统有限公司，流式细胞仪来源于美国艾森生物科技有限公司。

1.2细胞培养、TPX2基因的干扰及分组：将宫颈癌Hela细胞系置于37℃、5% CO2、饱和湿度的环境中，在含10%胎牛血清的RPMI1640培养基中培养。……