韩雨薇 王晨辰 李晓明

北部战区总医院神经外科，沈阳110016

0 引言

蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage，SAH）是一种危及生命的脑血管疾病，患者预后极差。早期脑损伤被认为是SAH预后不良的主要原因，诸多研究结果表明炎症在该过程中起着至关重要的作用[1]。

高迁移率族蛋白1（high-mobility group box 1，HMGB1）是一种经典的损伤相关分子，在弯曲DNA、稳定核小体形成和调控基因转录方面起着关键作用[2]。在病理状态下，HMGB1可由坏死细胞被动释放，也可由免疫细胞或非免疫实质细胞主动分泌。文献报道HMGB1水平显著上调，并与SAH不良预后和病死率相关[3]，且SAH后引发炎症进而导致早期脑损伤的发生发展。

沉默调节蛋白1（sirtuin 1，SIRT1）是一种烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）依赖的脱乙酰化酶，也是SIRT家族中研究最多的脱乙酰化酶之一。在脓毒症条件下，SIRT1可通过抑制HMGB1乙酰化进而抑制HMGB1的细胞外释放。已有研究结果证实可通过HMGB1中赖氨酸的脱乙酰化来调节炎症反应[4-5]，HMGB1可能是SIRT1的一个新的去乙酰化靶点。

笔者所在课题组前期研究结果表明五环三萜类化合物齐墩果酸（oleanolic acid，OA）对SAH后的早期脑损伤具有保护作用，但作用机制尚未完全清楚。因此本研究建立了大鼠SAH模型，进一步探讨OA对SAH后早期脑损伤的保护机制。

1 材料与方法

1.1 主要材料与仪器

OA（纯度98%，天津士兰科技有限公司），兔抗小鼠HMGB1单抗、兔抗小鼠乙酰化HMGB1单抗（美国Cell Signaling Technology公司），山羊抗兔SIRT1单抗（美国Abcam公司），兔抗小鼠β-肌动蛋白单抗（美国Santa Cruz公司），二喹啉甲酸蛋白定量试剂盒、蛋白酶磷酸酶抑制剂、RIPA裂解液、十二烷基硫……