陈巧玲 白亦光 别俊 杨蜜 张加勇

(南充市中心医院·川北医学院第二临床医学院 1.肿瘤科;2.骨科， 四川 南充 637000)

骨是一种有活力的组织器官，在形成和溶解的动态状态下保持平衡。其中成骨细胞是骨形成的重要细胞，参与维持机体的矿物质平衡[1]。当成骨细胞的分化过程受到阻碍，或者破骨细胞的活性亢进，都会导致骨质疏松症等疾病[2]。骨质疏松症是一种全身性的骨骼疾病，其特点是骨质微结构的退化，包括骨量减少和骨质脆性增加，这种变化增加了骨折的风险[3]。在骨质疏松的发生、发展过程中，成骨细胞的功能状态具有重要作用[4]。另外，在肿瘤骨转移等疾病发生发展过程中，由于肿瘤细胞的侵犯而导致成骨细胞的凋亡或分化功能的抑制，加重疾病的病程进展[5]。因此，研究成骨细胞的功能调控对于深入认识骨重建的过程及骨代谢疾病的防治具有重要价值。

磷脂酰肌醇3-激酶( PI3K)/ Akt 信号通路是正常生理状态下细胞的基础代谢通路，广泛参与真核细胞的增殖、分化和能量代谢等过程[6]，并且在肿瘤的发生、发展过程中还参与了肿瘤细胞的能量代谢[1]。本研究拟通过对PI3K蛋白的靶向抑制，探讨在成骨细胞分化成熟的过程中，成骨细胞细胞外基质的分泌情况和PI3K/Akt 信号通路下游蛋白表达的变化，从而更深入地认识靶向PI3K/ Akt 信号通路在成骨细胞分化过程中的作用机制。

1 材料和方法

1.1 主要试剂和实验动物 胎牛血清( FBS，Gibco BR)； LY294002(美国 Sigma 公司)；0.25%胰蛋白酶(美国 Sigma 公司)； PBS工作液(碧云天，中国)；……