王 菲，滕 霄，曹雪松

(聊城大学生命科学学院，山东 聊城 252000)

蛋白质是生命活动最重要的功能分子，蛋白质之间特定的相互作用构成了细胞内生物化学反应网络的重要组成部分，研究蛋白质相互作用机理可以加深我们对生命科学的认识。目前对蛋白质相互作用的研究技术主要有酵母双杂技术、双分子荧光互补技术(BiFc)、免疫共沉淀技术(Co-IP)、噬菌体展示技术、荧光能量转移技术(FRET)、pull-down技术等[1-8]。蛋白质相互作用发生在有活性的蛋白质与蛋白质、蛋白质与蛋白质亚基之间，很多是瞬时作用，而且失活蛋白质或错误折叠蛋白质往往会失去原有的与特定蛋白质相互作用的能力，这是蛋白质相互作用研究面临的难题。

蛋白质交联技术可以通过化学物质修饰蛋白质使其对特定位点或特定类型的位点具有亲和力[9]，从而建立牢固的蛋白质相互作用复合体，有效解决了上述难题[10]。蛋白质交联是指通过一定的化学试剂或催化剂，或将蛋白质与其它物质结合在一起，达到改善蛋白质功能性质的目的，交联过程中，共价键的形成可能伴随着消去部分基团，也可能伴随着附加部分基团[11]。目前常用的化学交联剂分为四类：第一类，与伯胺基团反应的交联剂(如N-羟基琥珀酰亚胺)，被广泛用于与赖氨酸残基上的N端和ε-氨基形成稳定的共价键，具有较高的反应效率[12-13]；第二类，巯基反应交联剂，可以通过烷基化(卤乙酰基)或二硫键交换(马来酰亚胺、吡啶二硫醇)修饰目标蛋白质上的巯基[14]；……