付啸峰，谢壁元

(广东省第二中医院 肿瘤科，广东 广州 510095)

肝癌是中国三大常见恶性肿瘤之一，严重威胁人们生命健康。近年来，随着临床治疗手段进步，肝癌患者生存率明显提高，但由于受到术后复发及肿瘤细胞转移等的影响，肝癌远期疗效仍然不佳[1-2]。MicroRNA是一类由内源基因编码的非编码单链RNA分子，是一种重要的肿瘤标志物，其在血液中的表达水平与肿瘤的诊断及预后密切相关[3-4]。循环肿瘤细胞(CTCs)是指实体瘤或转移灶释放进入外周血循环的肿瘤细胞，是恶性肿瘤患者出现术后复发及远处转移的重要原因，在评估肿瘤术后复发与远处转移、预后等方面的具有重要应用价值[5-6]。本研究探讨参芪化瘀方对肝癌患者的疗效及血清microRNA-139与CTCs水平的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2018年3月-2020年9月广东省第二中医院收治的80例原发性肝癌患者。纳入标准：①符合原发性肝癌相关诊断标准[7]；②肝癌根治手术术后患者；③预计生存期>6个月；④患者及其家属均知情并签署同意书，研究经医院伦理委员会批准。排除标准：①合并其他恶性肿瘤；②全身性感染；③自身免疫疾病；④药物过敏或不耐受；⑤已发生远处转移；⑥妊娠妇女等。采用随机数字表法分为对照组和研究组各40例。对照组中男26例，女14例；年龄42～68岁，平均年龄(60.35±6.58)岁；病程1～8年，平均病程(4.31±1.62)年；TNM病理分期：Ⅱb期14例，Ⅲ期16例，Ⅳa期10例。研究组男25例，女15例；年龄41～70岁，平均年龄(59.68±6.26)岁；病程1～8年，平均病程(4.63±1.49)年；TNM病理分期：Ⅱb期13例，Ⅲ期18例，Ⅳa期9例。两组患者的临床资料比较具可比性(P>0.05)。

1.2 方法

对照组给予奥沙利铂、5-氟尿嘧啶及醛氢叶酸(FOLFOX4)方案进行化疗，奥沙利铂(赛诺菲杭州制药，批号：20180112)：剂量85 mg/m2，静脉滴注2 h，d1；5-氟尿嘧啶(北京斯利安药业，批号：20180225)：剂量500 mg/m2，静脉滴注20 h，d1-2。醛氢叶酸(岭南制药，批号：20180225)：200 mg/m2，d1-2；4周为一个化疗周期。此基础上，研究组给予参芪化瘀方(丹参、黄芪各30 g，生牡蛎、莪术各20 g，蛇舌草、白术、丹皮各15 g，党参12 g，炙甘草6 g，蜈蚣1条)治疗，常规水煎至200 mL，分早、晚两次口服，100 mL/次，1剂/d。两组患者治疗8周后观察疗效情况。

1.3 观察指标

比较两组治疗前及治疗4周、8周后中医证候积分变化情况，其中主证按照0、2、4、6 分评定，次证按照 0～3分4级法评定，得分累加为中医证候积分。治疗前及治疗8周后对两组患者采用重氮盐法检测总胆红素(TBIL)水平，采用酶偶联法检测谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)水平，采用连续监测法检测碱性磷酸酶(ALP)水平。比较两组治疗前及治疗4周、8周后血清microRNA-139和循环肿瘤细胞(CTCs)水平变化，分别于患者治疗前及治疗4周、8周后采集患者静脉血(晨起未进食)3 mL，离心机离心(3 000 r/min)10 min，收集血清，采用聚合酶链式反应法检测microRNA-139表达水平，miRNA荧光定量检测试剂盒及耗材由LLC 公司提供；采用免疫荧光染色-染色体荧光原位杂交技术检测CTCs表达水平，相应试剂与耗材由默沙克生物公司提供。

1.4 疗效评价

参照《实体瘤治疗疗效评价标准-RECIST》[8]，分为完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、稳定(SD)及进展(PD)。CR：治疗后病灶消失且持续时间>4周；PR：治疗后病灶区缩小>30%，同时持续时间>4周；SD：病灶区缩小<30%，或增大<25%；PD：病灶区增大>25%，或出现新病灶或死亡。统计并比较两组有效率：(CR+PR+SD)例数/总例数×100%。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 两组患者中医证候积分变化情况

治疗4周、8周后，两组患者中医证候积分下降，且研究组更明显(P<0.05)。见表1。

表1 两组患者中医证候积分变化情况 分)

2.2 两组患者临床疗效情况

研究组总有效率(92.50%)明显高于对照组(77.50%)(P<0.05)。见表2。

表2 两组患者临床疗效比较 [n(%)]

2.3 两组患者肝功能比较

治疗8周后，两组患者TBIL、ALT、AST及ALP升高，研究组TBIL、ALT、AST及ALP低于对照组(P<0.05)。见表3。

表3 治疗前后两组患者肝功能比较

2.4 两组患者治疗前后血清microRNA-139、CTCs 水平变化

治疗前，两组患者血清microRNA-139、CTCs 比较差异无统计学意义(P>0.05)；治疗4周、8周后，两组患者血清microRNA-139均升高，CTCs均降低(P<0.05)；研究组治疗4周、8周后血清microRNA-139高于对照组，CTCs低于对照组(P<0.05)。见表4。

表4 两组患者治疗前后血清microRNA-139、CTCs 水平比较

2.5 两组患者临床安全性情况

治疗期间，两组患者临床不良反应发生无明显差异(P>0.05)。见表5。

表5 两组患者治疗期间不良反应比较 [n(%)]

3 讨论

肝癌是临床常见恶性肿瘤，相关数据显示，中国每年新发肝癌患者达百万人以上，近年来发病率及病死率均呈上升趋势[9-10]。中医学认为，肝癌属于“癥瘕”“肝积”等范畴，其病因多是由于机体正气虚弱、脏腑功能失调以及长期受到邪气侵袭，导致气滞血瘀、聚痰蕴毒互博而发病，其病机特点为本虚标实、虚实夹杂之证[11]。中医讲究辨证治疗，故以补正祛邪、活血解毒、散结消癥为治法，可起到标本兼治的作用[12]。

参芪化瘀方为治疗原发性肝癌的经验方，对原发性肝癌具有较好的疗效，该方主要由党参、丹参、黄芪、牡蛎及莪术等多味中草药组成，其中，党参、黄芪益气补虚，丹参活血祛瘀、凉血消痈，莪术补脾益气，牡蛎软坚散结，蛇舌草清热解毒，蜈蚣祛毒散结，全方具有扶正祛邪、活血解毒、散结消癥的功效[13]。此外，从现代药理学角度看，该方还具有提高机体免疫功能、抑制肿瘤细胞等作用[14]。本研究结果显示，研究组治疗后总有效率明显高于对照组，与左江伟[15]相关报道结果一致。这提示，参芪化瘀方对于提高肝癌术后患者的临床疗效作用重要。

MicroRNA-139是MicroRNA谱中重要成员之一，可通过下调Rho激酶2 抑制肿瘤细胞的进展与转移。研究[16-17]显示，miRNA-139在肝癌患者体内存在明显下调表达的情况，且与多种恶性肿瘤病情进展、预后及临床特征等都存在相关性，为判断恶性肿瘤患者肿瘤转移及预后的重要指标。CTCs是外周血中的各类肿瘤细胞的总称，CTCs多为实体肿瘤病灶脱落而进入外周血中，多数CTCs可发生凋亡或被吞噬，少数可逃逸并发展成为转移灶[18]。研究[19]表明，外周血CTCs是肝癌细胞转移的独立危险因素，其水平表达的高低与肝癌癌细胞发生转移、扩散以及肝癌患者的预后密切相关。彭磊等[20]发现，对于发生转移的肝癌患者治疗一定时间后，病情稳定或好转，外周血中CTCs明显减少，而对于病情出现恶化的患者，CTCs水平显著升高。本研究结果显示，治疗4周、8周后，研究组microRNA-139高于对照组，CTCs低于对照组。结果提示，参芪化瘀方可显著改善肝癌患者外周血中microRNA-139、CTCs的表达，从而有利于患者预后。

综上，参芪化瘀方可明显改善肝癌患者血清中microRNA-139、CTCs的表达，临床疗效满意，安全性高，可作为肝癌患者临床重要辅助治疗手段进行推广应用。