朱芸芸，陈 乐，魏晓晴，王梓灵，刘洪涛，杜鸿志, 3，刘大会

蕲艾治疗溃疡性结肠炎的活性筛选与作用评价

朱芸芸1，陈 乐1，魏晓晴1，王梓灵1，刘洪涛2，杜鸿志1, 3*，刘大会1*

1. 湖北中医药大学 中药资源中心，湖北 武汉 430065 2. 湖北中医药大学基础医学院，湖北 武汉 430065 3. 中国中医科学院 中药资源中心，道地药材国家重点实验室培育基地，北京 100700

评价蕲艾的抗炎活性，筛选其最佳抗炎活性部位，确证其对溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）的治疗作用。采用脂多糖（lipopolysaccharides，LPS）诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7建立体外炎性细胞模型，给予蕲艾水部位、正丁醇部位、醋酸乙酯部位、石油醚部位进行干预，观察各组细胞形态；采用Griess法测定各组细胞上清液中一氧化氮（nitrite oxide，NO）水平；采用ELISA法检测各组细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、IL-1β水平；采用qRT-PCR法检测各组细胞、、、环氧合酶-2（cyclooxygenase-2，）、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，）和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（nucleotide binding oligomerization domain-like receptor protein 3，）mRNA表达情况。利用超高效液相色谱（UPLC）法对最佳抗炎活性部位的主要化学成分进行定量分析。建立2.5%葡聚糖硫酸钠（dextran sodium sulfate，DSS）诱导的小鼠UC模型，给予蕲艾醋酸乙酯部位和异泽兰黄素，记录各组小鼠体质量、摄食量和饮水量变化，并进行疾病活动指数（disease activity index，DAI）评分；测量结肠组织长度，并采用苏木素-伊红（HE）染色法观察各组小鼠结肠组织病理变化；采用免疫组化法检测各组小鼠结肠组织紧密连接蛋白-1（zonula occluden-1，ZO-1）表达情况。与模型组比较，10 μg/mL蕲艾醋酸乙酯部位能够抑制LPS诱导的RAW264.7细胞的分化程度，显著降低上清液中NO、TNF-α、IL-6和IL-1β水平（＜0.01），下调、、、、和mRNA表达水平（＜0.05、0.01）。……