贺海波，朱丽金，贺君宇，江伟杰，王 晓，彭 校，陈烨韬，宋利华，张继红，邹 坤

委陵菜酸对幽门螺杆菌诱导GES-1细胞损伤的保护作用

贺海波1，朱丽金1，贺君宇2，江伟杰1，王 晓1，彭 校1，陈烨韬1，宋利华1，张继红3*，邹 坤1

1. 三峡大学 天然产物研究与利用湖北省重点实验室，药食同源大健康产品开发利用宜昌市重点实验室，湖北 宜昌 443002 2. 三峡大学医学院，湖北 宜昌 443002 3. 三峡大学中医临床医学院脾胃病科，湖北 宜昌 443002

探索委陵菜酸对幽门螺杆菌（，Hp）诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的影响。GES-1细胞与Hp共培养，给予委陵菜酸和NOD样受体家族3（NOD-like receptor family 3，NLRP3）抑制剂MCC950，考察各组细胞存活率、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）释放率、集落形成、凋亡率、线粒体膜电位和活性氧自由基（reactive oxygen species，ROS）变化；采用ELISA法检测各组细胞上清液中单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemotactic protein-1，MCP-1）、角质细胞趋化因子（keratinocyte chemokines，KC）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-1β（interleukin -1β，IL-1β）、IL-6、IL-18、IL-4和IL-10水平；采用试剂盒检测各组细胞谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、过氧化氢酶（catalase，CAT）活性和丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量；采用qRT-PCR检测各组细胞Toll样受体4（toll-like receptor 4，）、髓样分化因子88（myeloid differentiation factor 88，）、、、和mRNA表达情况；采用Western blotting法检测各组细胞TLR4/NLRP3/核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）和线粒体凋亡信号通路相关蛋白表达情况。委陵菜酸显著抑制Hp诱导的GES-1细胞LDH释放率（＜0.05、0.01），促进细胞集落形成（＜0.05、0.01），抑制细胞凋亡（＜0.05、0.01）；升高细胞线粒体膜电位（＜0.01），降低ROS水平（＜0.01）；降低上清液中MCP-1、KC、TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-18水平（＜0.01），升高IL-4和IL-10水平（＜0.01）；升高细胞GSH-Px、SOD和CAT活性（＜0.01），降低MDA含量（＜0.01）；降低细胞、、、mRNA表达水平（＜0.01），升高、mRNA表达水平和/、/（＜0.01）；下调细胞TLR4、MyD88、磷酸化IκB激酶β（phosphorylated inhibitor kappa B kinase β，p-IKKβ）、p-IκBα、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（apoptosis-associated speck-like protein，ASC）、半胱氨酸蛋白酶-1前体（pro-Caspase-1）、Caspase-1、硫氧还蛋白互作蛋白（thioredoxin-interacting protein，TXNIP）、pro-IL-1β、pro-IL-18、Bax、Bad、细胞色素C、凋亡酶……