李海洲，张艳炜，许英杰，杨 门，张 磊，韩京军

1.中山大学附属第八医院心胸外科，广东 深圳 518000；

2.深圳市疾病预防和控制中心免疫规划科，广东 深圳 518055

miRNA是一类广泛分布于多细胞生物中的非编码RNA，通过与靶基因mRNA 3’非翻译区（3’-untranslated region，3’-UTR）结合使其降解或抑制翻译，在蛋白质的合成过程中发挥调节作用［1］。研究［1-3］证实，miRNA通过调控基因表达，发挥多种生物学功能，影响细胞的增殖、分化、发育、凋亡和代谢，miRNA不仅参与机体的生长发育等正常生理过程，还参与肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭和肿瘤血管形成等过程。研究［4］显示，miR-933过表达对肺癌的增殖、侵袭具有抑制作用。miRNA具有肿瘤特异性，在不同肿瘤中有特定的表达水平，通过肿瘤组织与正常组织的miRNA表达谱对比分析，可发现不同肿瘤特定的异常表达miRNA，对肿瘤的早期诊断有重要意义［5］。Kruppel样锌指转录因子6（Kruppellike zinc finger transcription factor 6，KLF6）是KLFs家族的重要成员，是已被证实的抑癌基因［6］，在前列腺癌［7］、结直肠癌［8］、鼻咽癌［9］等肿瘤中发挥着抑癌基因的作用。本研究旨在明确miR-933对KLF6基因的调控作用，以及对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡等过程的影响并探讨相关机制。

1 材料和方法

1.1 细胞来源及主要试剂

人肺癌细胞系H460、A549，以及正常人肺支气管上皮细胞系BEAS-2B均购自中国科学院典型培养物保藏委员会昆明细胞库。

DMEM培养基和胎牛血清购自美国Gibco公司，LipofectamineTM2000转染试剂购自美国Invitrogen公司，TRIzol试剂购自美国Invitrogen公司，实时荧光定量聚合酶链反应（r e a ltime fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR）试剂盒购自日本Takara公司，细胞计数试剂盒-8（cell counting kit-8，CCK-8）购自日本Dojindo公司，miR-933 mimic和mimic NC购自生工生……