严欣亮

（江阴市第三人民医院，江苏 江阴214400）

我院检验科生化室配有一台mindry BS-2000全自动生化分析仪，检验科门急诊部配有一台美国强生公司的VITROS-350型全自动干化学分析仪，两台生化分析仪检测同一份标本所得结果有时会出现明显不同，给临床医生带来困惑，给诊断、评估病情、解释结果带来一定困难。现用科学的方法对两台生化仪进行比较分析，深入了解两种分析方法的特点和各自的优缺点，为我院实验室用两种方法检测结果的可比性提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 仪器mindry BS-2000全自动生化分析仪；强生VITROS-350全自动干化学分析仪。

1.2 试剂mindry BS-2000全自动生化分析仪所有试剂均为深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司提供的配套试剂；强生VITROS-350全自动干化学分析仪试剂由强生公司生产的用于该仪器的原装干片试剂。

1.3 样本 随机抽取我院住院或门诊患者无脂血、无溶血正常值和异常值新鲜血清40份，标本浓度范围尽量覆盖当日最高浓度和最低浓度；1例新鲜配置混合血清15mL（混合后检测TP 70.5g/L，BUN 5.6mmol/L，ALT 45U/L）；4例生化质控血清（批号1227UN及909UE）各测两次。

1.4 方法

1.4.1 实验前准备：校准将要对比的两个系统，按照两台仪器检测方法要求分别完成质控，保证两台仪器均在良好的质量控制状态。

1.4.2 干化学法：强生VITROS-350用原装校准液进行校准。（强生公司提供校准液）

1.4.3 湿化学法：mindry BS-2000生化分析仪使用“江苏朗道生物技术有限公司”校正液校正（批号CAL2351）；

1.4.4 质控品选用“江苏朗道生物技术有限公司”提供的干粉质控品，用双蒸馏水复溶后使用。40份患者血清标本及4例生化质控血清样本分别在两台生化分析 仪 上 测 定ALT、AST、GGT、ALP、LDH、CK、BUN、Glu、UA、CREA、TP、ALB、TB等13个项目，所有测试在2小时内完毕。

1.5 统计学方法 采用SPSS 17.0软件分析，对13对26个数据进行正态性检验，即K-S检验，符合正态性分布的数据再进行方差齐性检验，呈正态性分布，且方差齐的各组数据采用配对t检验，非正态分布或方差不齐的各组数据采用秩和检验，开展直线相关与回归分析。

2 结果

2.1 两台仪器当月质控结果CV%均控制在5%以内，可见两仪器性能良好，测试结果稳定、可靠，精密度好。

2.2 重复性实验 取新采集的新鲜血液配置的混合血清，用两台仪器分别测20次，分别计算平均值、标准差及批内CV%，批内CV%均小于国家规定的CV%[1-2]。结果表明，使用试剂稳定，仪器状态良好，结果重复性好。

2.3 对两台生化分析仪的两组检测结果分别进行正态性检验，即K-S检验，其中TP、GLU、UA、ALB、ALP两组数据分别P>0.05，数据呈正态分布。对这五组数据进行方差齐性分析P>0.05，说明方差齐。因此，用参数检验中的配对样本t检验。见表1

表1 成对样本t检验

2.4 BUN、TB、CREA、LDH、ALT、AST、GGT、CK正态性分析的P<0.05，数据不呈正态分布，可用非参数检验中的秩和检验。经检验，GLU、ALB、ALP、TB的P>0.05，差异无统计学意义；CREA、LDH、ALT、AST、GGT、CK、BUN、TP、UA各项的P<0.05，差异有统计学意义。见表2

表2 成组设计两样本比较的秩和检验

2.5 对两台仪器的分析结果进行线性检验线性回归分析，所测项目的r（相关系数）都大于0.94，相关性检验P<0.01；结果显示两台仪器分析结果的相关性和线性都良好。见表3

表3 干化学与湿化学法测定结果回归方程及线性评价（n=44，±s）

表3 干化学与湿化学法测定结果回归方程及线性评价（n=44，±s）

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3 讨论

湿化学法和干化学法血清标本生化项目测定的形式不同，一个在液体试剂环境，一个是干片状态，湿化学法的浓度测定基于光的朗伯-比尔定律，而干化学法测定的原理是入射光通过基质被吸收后，检测反射光的强度来计算出被测物质的浓度[3]。

湿化学分析是最常用的方法，经多年发展、完善，已形成一套完整成熟的全自动分析方法，而干化学分析法是近几年随着POCT的发展而出现的一种新的分析方法，其采用比较独特的多涂层膜技术，选择性的阻留或去除干扰物质，能掩盖待测物质的有色物质，为其提供反应背景。能将反应原理的各种物理反应、化学反应在各个分层中进行，使其一层反应完成后所得产物又可进入另一层中进行反应，使各层可给出一种特定的环境用以控制反应序列和反应时间[4]。从而引导反应序列。仪器吸样部分有压力感受系统，样品凝固或者过少都能被感受到，杜绝了结果错误；其检测所用的干片、吸头等都是一次性用品；没有管道系统，也没有比色杯。因此，不需要蒸馏水冲洗，完全避免了样品间、试剂间的干扰；所需样品极少，分析速度快，可同时检测多个生化项目，干化学法已成为急诊生化检测的又一新手段[5-6]。

干化学、湿化学两种分析方法测定的部分生化项目中TB、BUN、CREA、ALT、AST、ALP、GGT的测定结果存在差异，经过相关回归分析，发现两种方法所测结果的相关性良好（r>0.93），可见，两种分析方法的差异属于系统误差，其产生的原因主要是试剂加入方式不同及分析原理不同所引起。误差属于系统误差，湿化学法又比较成熟，在实际工作中，应该以湿化学法分析作为参考标准。方法用相同的校准品每周同时进行校准，干化学法利用线性方程=a+bx，设定a和b就可获得一致的结果。值得一提的是LDH，两种仪器的测定结果差异较大，干化学法测定LDH采用丙酮酸和NADH在LDH作用下生成乳酸和NAD+与湿化学法相反。但相关性良好（r=0.9876），同样的可以利用线性方程=a+bx，设定a和b值，也可获得一致的结果。因此，要定期对不同分析仪进行校准，并比对检测结果，保证每台仪器测定结果的准确性和可靠性，为临床提供有参考价值的数据。