高健明，汪 靖，刘 晨，肖 良，彭 江，汪爱媛，徐宏光

1皖南医学院 脊柱研究中心，皖南医学院第一附属医院弋矶山医院 脊柱外科，安徽芜湖 241001；2 解放军总医院 全军骨科战创伤重点实验室，骨科再生医学北京市重点实验室，北京 100853

下腰痛是临床常见疾病，目前认为椎间盘退变是导致下腰痛的主要原因[1]。椎间盘中，软骨终板由透明软骨组成，是供应成熟椎间盘营养物质的主要通道[2]。软骨终板细胞(cartilage endplate cell，CEP)功能异常和数量减少会导致软骨终板钙化或硬化进而减少椎间盘营养物质的供应，最终导致椎间盘退变的发生。有研究表明软骨终板存在原位干细胞即软骨终板干细胞(cartilage endplate stem cell，CESC)，具有较强的克隆形成能力和多向分化潜能[3-5]。骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell，BMSC)是一种骨髓来源的干细胞，在一定条件下能够分化成为成骨细胞、成软骨细胞、成肌细胞、脂肪细胞、神经细胞等，可用于多种组织缺损的修复[6]。随着组织工程学的发展，BMSC 作为一种具有多种分化潜能的种子细胞越来越受到人们的关注。本实验获取了大鼠腰椎软骨终板组织，分离出CEP 和CESC，将CEP 分别与CESC、BMSC 进行体外非接触式共培养，通过检测各共培养组的增殖与凋亡，及软骨表型基因ACAN、COLⅡ及Sox9 的表达，对比探讨CESC、BMSC 对CEP 的影响，进而探讨CESC 作为组织工程种子细胞的潜在可能。

材料和方法

1实验动物 SD 清洁级大鼠20 只，体质量200～300 g，雌雄不限，由北京市科宇动物养殖中心提供。

2主要试剂 0.25% EDTA-胰酶(Gibco)；0.2%Ⅱ型胶原酶(Sigma)；DMEM/F12 (Gibco)；干细胞培养用血清(上海双洳生物科技有限公司)；干细胞成骨分化诱导培养基(赛业生物科技有限公司)；……