聂芳，李可，王媛，许颖

(1.成都医学院临床医学院第一附属医院检验科； 2.成都医学院临床医学院；3.成都医学院检验医学院，四川 成都 610500)

肝脏缺血再灌注损伤(hepatic ischemia reperfusion injury，HIRI)指肝脏组织器官由于多种原因导致缺血，造成细胞组织器官的损伤，而缺血之后进行再灌注，细胞组织器官相关功能仍无法恢复，并且使其损伤更为严重，这也是肝脏切除和肝移植手术、低血容性休克、毒性肝损伤、静脉阻塞性病变等疾病过程中最常见的病理生理现象[1]。HIRI 可导致10%早期肝脏移植后器官衰竭、45%器官损伤和急慢性组织排异现象[2-3]。然而，目前仍然缺乏对于HIRI的有效监测指标和防治措施。TTC36是一个新发现的具有3个连续C端四肽重复(tetratricopeptide repeat，TPR)结构域的蛋白分子， Liu等[4]报道通过 TPR 结构域与热休克蛋白70(HSP70)的C端相互作用发挥分子伴侣的功能，Jiang等[5]报道TTC36作为抑癌基因参与调控肝癌细胞的凋亡，Xie等[6]报道TTC36参与4-羟苯基丙酮酸双加氧酶(4-hydroxyphenylpyruvic acid dioxygenase，HPD)的降解导致酪氨酸血症和神经损伤。本实验拟研究TTC36在缺氧复氧诱导的肝细胞损伤中的动态变化规律，为进一步深入探讨TTC36在肝脏缺血再灌注损伤中的作用奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

人正常肝细胞LO2由华西科技园肿瘤分子靶向治疗研究室夏洪伟博士惠赠；TTC36鼠源性单克隆抗体由深圳市龙华区人民医院检验科刘运洪博士惠赠；辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠二抗购自北京中杉金桥生物技术有限公司；0.25%乙二胺四乙酸(EDTA)的胰酶、胎牛血清、高糖Dulbecco改良的Eagle培养基(DMEM)培养基、磷酸缓冲盐溶液(PBS)(Gibco公司)；……