李夏西，陈泽敏，胡威，黄思霖，龚伟

结肠癌是发病率第三的恶性肿瘤，全世界2020年有190万新病例，93万人死亡[1-2]。国内流行病学研究显示，结肠癌的发病率持续升高[3-4]，很多患者诊断时已经发生远处转移，5年生存率低于10%[5-6]，且近年来发病年龄呈现年轻化趋势[7]。对于结肠癌，手术和化疗是首选的治疗方式，但创伤大[8]。近年来出现很多新型治疗如靶向治疗、基因治疗[9-10]以及各类治疗方法联合[11]。特别是内镜技术结合消融技术为结肠癌的治疗开发了新方向。

基于非热效应杀伤细胞的不可逆电穿孔(irreversible electroporation, IRE)是一种新兴的肿瘤消融技术。近年来以纳米刀(nanoknife)治疗仪的形式被引入治疗不能实施手术的实体肿瘤和局部晚期癌症，包括前列腺癌、肾癌、肝癌、骨癌和胰腺癌等靠近重要结构的癌灶，且已展现出良好的治疗和生存改善效果[12-15]。 然而目前IRE对结肠肿瘤有效治疗的报道仍较少，其作用机制也不甚清楚。因此，本研究旨在通过探讨IRE对不同分化程度结肠肿瘤细胞株增殖的抑制作用，考察IRE对结肠肿瘤治疗的有效性，期望未来能为将IRE技术常规应用于治疗结肠肿瘤提供可靠证据。

1 材料与方法

1.1 细胞培养

实验选取结肠癌低分化细胞株HCT116，中分化细胞株SW480和SW620，高分化细胞株LoVo。癌细胞培养基：内含10%胎牛血清(fetal clf srum, FBS)，100 U/mL青霉素(penicillin, P)、100 μg/mL链霉素(streptomycin, S)的DMEM培养基；KYSE-150培养基：45% RPMI-1640+45% Ham’s F-12+10% FBS+1% P/S；KYSE-410培养基：90% RPMI-1640+10% FBS+1%P/S。以上所有细胞均为贴壁生长，于37℃、CO2培养箱内常规培养。

1.2 不可逆电击实验及细胞活性检测

取对数生长期的结肠癌细胞，用0.25% Trypsin-EDTA消化后重悬于培养基中。……