姚燕丽 黄宇哲 韩芝斌 曹春玲 吴静标

DNA 甲基化是表观遗传学领域研究的重点之一［1］。DNA 甲基化是指在DNA 甲基转移酶（DNA methyltransferase，DNMT）的作用下，基因组DNA 序列上CpG 岛的二核苷酸5′端胞嘧啶转变为5′甲基胞嘧啶。DNA 的异常甲基化通常发生在肿瘤的超早期，是肿瘤生长的“种子”因素［2］。CpG 存在两种形式，一种为分散型的中高度重复序列；另一种为高度聚集，形成CpG 岛［3］。CpG 岛中的CpG 一般是非甲基化状态，其异常甲基化与肿瘤息息相关。甲基化一般都是连续发生的，即某一CpG 位点发生甲基化，那么该位点上下游一定区域内的CpG 也发生甲基化。研究表明，基因组启动子区甲基化，会改变重要遗传基因表达，是导致癌症发生的原因之一［3］。随着癌症进程改变，甲基化也会动态改变。此外，不同肿瘤的甲基化图谱也存在明显的差异。综上，利用甲基化检测对肿瘤进行早期筛查具有很大应用潜力［4］。循环肿瘤DNA（circulating tumor DNA，ctDNA），属于血液循环游离DNA（cell-free DNA，cfDNA）的一种，作为近年来肿瘤领域检测的研究重点，在肿瘤无创前期早筛中具有重要应用价值。本文将综述甲基化的各检测技术，对DNA 甲基化的临床应用情况进行总结，分析相关产品目前存在的技术难点及未来发展趋势。

1 特异位点甲基化检测方法

有效的甲基化基因检测手段是应用的关键。近年来，市面上出现了不少DNA 甲基化的检测技术，发展已达十几种［5-6］，按照技术类型，分为甲基化特异性扩增技术［如甲基化特异性PCR、甲基化特异性半巢式/巢式PCR、甲基化敏感性限制性内切酶……