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共载HBx-siRNA与五味子油阳离子脂质体纳米粒的制备及其对乙型肝炎体外药效学研究

2021-08-05李娅兰李建月

中草药 2021年15期

王 锐,李娅兰,李建月,杨 婧

1.黑龙江中医药大学,黑龙江 哈尔滨 150040

2.黑龙江中医药大学基础医学院,黑龙江 哈尔滨 150040

乙型病毒性肝炎是由乙肝病毒诱发的以肝脏病变为主的传染性疾病。由世界卫生组织统计报道全球慢性乙肝病毒患者约有2.57 亿,且88.7 万人因感染乙肝病毒而死亡,中国乙肝病毒患者约9300 万例,其中慢性乙型肝炎病患约2000 万例[1-2]。小干扰RNA(siRNA)技术广泛应用于乙肝病毒的治疗。但裸siRNA 生物半衰期短,容易被胞浆、血液和组织中的酶类降解,生物利用度低。细胞膜表面带有负电荷,且siRNA 是带有负电荷的亲水性物质,因此,siRNA 进入细胞需要载体介导。北五味子具备护肝的功能,目前对于木脂素的研究较为广泛,对于北五味子油的研究较少,牛莉萍[3]研究发现北五味子油可通过增加HepG2 细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)含量而达到使HepG2 细胞凋亡的功能。脂质体作为一种非病毒载体具有无传染性、无载体容量制约、化学结构可操控,无致瘤危险和抗原性[4-7]。siRNA 为水溶性物质,利用阳离子脂质体可同时装载水溶性物质和脂溶性物质的特点,选取具有保肝作用的北五味子提取物五味子油[8-9],将两者同时装载于阳离子脂质体内,探究五味子油是否可协同乙型肝炎型小干扰RNA(HBx-siRNA),以达到更好的抑制乙肝病毒的功效。

1 仪器与材料

1.1 仪器与设备

OSB-2200旋转蒸发仪,日本EYELA 株式会社;超声细胞破碎仪,美国SONICS公司;SYNERGY H1酶联免疫检测仪,美国伯腾仪器有限公司;JEM-2100 透射电子显微镜(TEM),日本电子株式会社;U-CTR30-2 荧光倒置显微镜,德国徕卡公司;……

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