林杰，王卫东，区活辉，何威，陈坚平，马靖，左海波，刘清波

肝胆管细胞癌（intrahepatic cholangiocarcinoma，ICC）来源于肝脏二级胆管树，发病率居肝脏原发性恶性肿瘤第2位，仅次于肝细胞癌［1］，其危险因素主要包括肝脏吸虫慢性感染、原发性硬化性胆管炎以及肝炎病毒感染等［2-4］。ICC具有发病隐匿、进展迅速、根治性切除率低等特点，临床预后较差［5］。虽然根治性切除率不断提高，但是ICC容易沿着胆管壁、神经和淋巴管向远处转移［6-7］，术后复发率高达80.0%，5年生存率仅为5.0%～15.0%［8-9］。与肝细胞癌不同，ICC目前尚无疗效确切的靶向治疗药物［10］。因此，深入研究ICC的发病机制，挖掘特异性表达基因，尝试发现新的药物治疗靶点，改善ICC患者的整体预后是目前研究的方向。C型凝集素结构域家族5成员A（C-type lectin domain family 5，member A，CLEC5A）为Ⅱ型跨膜蛋白，主要表达于髓系细胞细胞膜，与血液系统细胞的恶性分化密切相关［11］，其低表达于急性髓系白血病，可能发挥抑癌作用［12］。然而，该基因与ICC的关系国内外尚少见报道。本文拟通过免疫组化染色检测ICC患者癌组织和癌旁组织中CLEC5A的表达，利用慢病毒转染技术构建CLEC5A过表达RBE细胞株，分析CLEC5A对细胞生物学特性的影响，从而揭示CLEC5A在ICC发生发展过程中的作用。

1 材料与方法

1.1 标本来源ICC癌组织和癌旁组织均为石蜡组织标本，源自2014年1月—2015年10月在我院行根治性手术治疗的25例ICC患者。所有患者术后均经病理学检查确诊，术前未经放化疗等抗肿瘤治疗，患者均已签署知情同意书，研究已通过医院伦理委员会审核（文件批准号2020091）。

1.2 主要试剂及仪器ICC RBE细胞株购自中科院上海细胞库，慢病毒购自上海吉凯公司。……