肖 凡，查 晴，刘 亚，杨 玲，叶佳雯，刘 艳

（上海交通大学医学院附属第九人民医院心血管内科，上海 200011）

目前，心血管病的负担越来越严重，已成为全球较为严重的公共卫生问题。流行病学研究显示心血管病的死亡率占居民总死亡原因的首位[1]。而脂质沉积是心血管病的重要危险因素之一[2]。既往研究证明，氧化低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein，Ox-LDL）诱导的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell，VSMC）的增殖效应可被沉默信息调节蛋白1（silencing information regulatory protein 1，SIRT1）阻断[3]。抑制平滑肌细胞的增殖则有利于抵抗血管重构，从而减少血管生理异常的发生和发展[4-5]。

本课题组前期研究发现，APE小鼠发生脂质沉积的血管区域中存在卵泡抑素样蛋白1（follistatinlike protein 1，FSTL1）表达降低的现象。有研究报道，FSTL1也可参与细胞增殖调控的过程中[6]，例如FSTL1抑制增殖相关通路的激活从而抑制肿瘤细胞增殖能力[7]。FSTL1是否参与Ox-LDL调控血管增殖的过程鲜有报道。本研究旨在探讨Ox-LDL和FSTL1参与VSMC增殖发生和发展。

材料与方法

一、材料

4周龄、雄性C57BL/6J小鼠（北京维通利华实验动物技术有限公司上海分公司）用于VSMC的提取。胎牛血清（fetal bovine serum，FBS）、磷酸盐缓冲液（phosphate buffer saline，PBS）、青霉素-链霉素（penicillin-streptomycin）双抗溶液、抗青霉素-链霉素-新霉素（anti-penicillin，streptomycin,and neomycin）三抗溶液、0.25%胰蛋白酶（trypsin）、DMEM培养基（dulbecco’s modified eagle medium）均购自美 国Gibco公司。其他有人重组FSTL1（美国R&D Systems公司）、SIRT抑制剂（中国Med Chem Express公司）、细胞活力检测试剂盒（cell counting kit-8，CCK-8）（日本Dojindo公司）。RNA反转录试剂盒及实时定量PCR检测试剂盒购于日本Takara公司。FSTL1抗体（1∶1 500）购自美国Abcam公司。Ox-LDL购于赛默飞世尔科技（中国）有限公司。

二、方法

1.动物分组：实验动物载脂蛋白E（apolipoprotein E，ApoE）-/-小鼠分为对照组（普通饲料喂养4个月）和血管病变组（高脂喂养4个月），每组6只小鼠。……