瞿根义，徐 勇，阳 光

中南大学湘雅医学院附属株洲医院泌尿外科，湖南株洲 412007

肾结石是我国最常见的泌尿外科疾病之一，而湖南省是我国肾结石发病率最高的省份之一。草酸钙结石是最常见的肾结石类型，所占比例为70%～80%[1]，目前草酸钙结石的发病机制尚未完全阐明且缺乏有效的预防措施，治疗后复发率也很高。因此，深入探讨草酸钙结石的发病机制，寻找新的有效干预靶点，仍是肾结石治疗和预防的重点，且具有重要的科研和临床意义。

研究发现，巨噬细胞可明显促进细胞的晶体吞噬作用并减少肾脏晶体数量[2]。OKADA等[3]在草酸钙结石大鼠模型中发现草酸钙晶体诱导肾小管上皮细胞损伤后，巨噬细胞在骨桥蛋白、CD44、纤维连接蛋白介导下，吞噬并消化晶体。并且研究证实草酸钙晶体可以诱导人肾小管上皮细胞miRNA表达谱发生明显的改变，且miRNA在调节巨噬细胞极化过程中扮演着重要角色[4]。同时有研究表明miR-34c对巨噬细胞形成具有调控作用[5]。因此，本研究拟探讨miR-34c对巨噬细胞极化分型、晶体吞噬作用和迁移能力的影响及其作用机制，为临床预防和治疗肾结石提供一定依据。

1 材料与方法

1.1主要材料与试剂 小鼠巨噬细胞(Ana-1细胞)和小鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E细胞)购自上海中科院细胞库；miR-minics和miR-inhibitor及其相应空白对照(pre-miR-NC和anti-miR-NC)慢病毒重组质粒购自上海吉玛制药技术有限公司；miR-34c、GAPDH试剂盒购自美国Ambion公司；CD80、CD86、CD163和CD206抗体均购自北京博奥森生物技术有限公司；DMEM培养基和胎牛血清购自德国Sigma公司；……