何锋荣 操龙斌 张琳 郑介婷 邱欣 邱峰南方医科大学南海医院医学检验科，广东 5844；南方医科大学中医药学院，广州 5055

动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是由环境和遗传等多种因素共同作用所导致的一类长期且复杂的血管病变，是冠心病、脑血管病和血栓栓塞性疾病等缺血性心脑血管病的主要病理基础［1-2］。血管内皮细胞是直接暴露于循环系统中代谢产物等相关内源性危险因子的细胞，氧化应激诱导血管内皮细胞损伤对AS形成和发展中的诸多病理学环节均具有重要作用［3］。因此，寻找能够对抗活性氧引起的氧化应激损伤对治疗动脉粥样硬化具有重要临床意义。我们前期研究发现，穗花杉双黄酮（AF）可有效保护羟基自由基（•OH）氧化诱导的细胞损伤，但具体机制不明，既往也没有研究。本研究用过氧化氢（H2O2）处理血管内皮细胞，构建氧化应激损伤的血管内皮细胞模型，采用不同浓度的AF干预。观察AF对内皮细胞活力、凋亡等指标的影响，检测相关细胞因子、基因、蛋白表达情况。旨在初步探索穗花杉双黄酮对巨噬细胞极化的分子调控作用，为动脉粥样硬化提供新的治疗靶点和理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料、试剂 人脐静脉内皮细胞系（HUVECs）购自美国ATCC，RPMI1640培养基、双抗（青霉素-链霉素）、胰蛋白酶（Hyclone）、胎牛血清（FBS）购自赛默飞世尔生物化学制品（北京）有限公司，AF、二甲基亚砜（DMSO）、3%H2O2购自美国Sigma公司，细胞计数试剂盒8（cell counting kit-8，CCK-8）检测试剂购自东仁化学科技上海有限公司，乳酸脱氢酶（LDH）和超氧化物歧化……