许文杰，熊雄，黄曼虹，李壹，操敏，陆利霞，熊晓辉,2

（1.南京工业大学食品与轻工学院，江苏南京 211816）

（2.江苏省食品安全快速检测公共技术服务中心，江苏南京 211816）

金枪鱼（Tuna），又被称为吞拿鱼、鲔鱼，属于硬骨鱼纲（Osteichthyes）鲈形目（Pereiformes）的鲭科（Scombridae）鱼类[1]。肉质鲜美柔嫩，营养价值高，尤其是其所含的DHA（二十二碳六烯酸）和EPA（二十碳五烯酸）等多不饱和脂肪酸，使得金枪鱼有着“海底黄金”的美称[2]。

金枪鱼制品加工方式多样，可冰鲜切片、油浸、煎炸、烘烤等。由于加工破坏了外形特征，使得通过形态学的方法对物种鉴别就变的比较困难。一些不法商贩为谋取更大的利润，用低价值鱼类替代高价值金枪鱼的现象时有发生。在金枪鱼消费市场中，除6种经济价值比较高的优质金枪鱼外，另外一些相似的品种，如巴鲣（Euthynnus affinis）、扁舵鲣（Auxis thazard）、东方狐鲣（Sarda orientalis）等鱼类也常常用于生产金枪鱼罐头、鱼松等产品[3,4]。因此，有效区分和鉴定金枪鱼品种具有重要意义[5]。

基于DNA技术的分子生物学方法具有特异性高、灵敏度强的优势，在区分和鉴定鱼源性成分中具有重大意义[6-9]。常见的鉴定方法有限制性片段长度多态性（Restriction Fragment Length Polymorphism，RFLP）[10]、DNA条形码（DNA barcoding）[11-13]、环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）[14-16]、实时荧光定量PCR技术（Real-time PCR）[17-19]。

在检测方法建立初期，提取高质量、高纯度及结构完整的基因组DNA是后续试验顺利进行的保障。然而，鱼肉制品在加工过程中经常添加如单宁酸、亚硝酸盐、脂类、酚类等大分子化合物，这些物质会影响DNA模板的质量，从而导致PCR扩增效率降低[20]。Xiong X等[7]从在罐头制品中提取DNA，发现DNA质量较差，PCR扩增成功率只有40%，并发现罐头产品中油脂较多抑制了PCR扩增效率。……