颜 超，赵 强

(四川省德阳市第二人民医院普外科 618000)

结直肠癌(CRC)是全球癌症相关发病率和病死率高的主要原因[1-2]。此外，大部分CRC患者初次诊断时即为晚期，且具有高转移性和复发性，严重威胁人类的生命健康，因此探索新的生物标记物用于改善临床CRC诊断和治疗效果至关重要[3]。细胞侵袭和迁移行为是影响肿瘤转移的重要因素，而靶向驱动调控基因可能是治疗恶性肿瘤疾病并提高生存率的理想策略[4]。微小RNA(miRNA)是内源性非编码小RNA，可以在转录水平上调节靶mRNA表达，参与疾病发展进程[5]。QIN等[6]研究发现，miR-4458在结肠癌细胞被下调，过表达miR-4458可以抑制细胞增殖、糖酵解和乳酸形成，但miR-4458对结肠癌细胞凋亡、侵袭和迁移影响及其作用机制尚未阐明。本研究旨在探索miR-4458过表达对CRC细胞系人结肠癌细胞(HT-29)凋亡、侵袭、迁移及上皮间质化(EMT)影响，并初步探索其作用机制，以期为开发CRC临床诊断和治疗新方法提供思路。

1 材料与方法

1.1 主要材料与仪器

1.1.1主要材料

人结肠癌细胞(HT-29，TCHu103)和人正常结肠上皮细胞(HCoEpiC，C1388)购于中国科学院细胞库；miR-4458 mimics、miR-4458 NC由广州市锐博生物科技有限公司设计合成；miR-4458、STAT3、U6、GADPH引物序列由上海生工生物工程有限公司设计合成；细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit 8，CCK-8，CA1210)、RPMI 1640培养基(10491)、Matrigel胶(356234)、Trizol试剂盒(15596-018)、RIPA裂解液(R0010)、ECL发光液(PE0010)购于北京Solarbio公司；胎牛血清(C0227)、上皮型钙粘蛋白(E-cadherin，AF0138)和波形蛋白(Vimentin)鼠抗人单克隆抗体(AF0318)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)兔抗人多克隆抗体(AF0243)购于上海碧云天公司；PureLinkTMRNA Mini试剂盒(12183025)、山羊抗兔lgG(H+L，A32731)和山羊抗小鼠lgG(H+L)二级抗体(A32723)购于美国Thermo Fisher Scientific公司。

1.1.2主要仪器

MA100N型倒置显微镜由日本Nikon公司生产；……