姬康祁,周文科

(新乡医学院第一附属医院神经外科/河南省神经修复重点实验室，河南新乡 453000)

蛛网膜下腔出血(SAH)是脑卒中的严重亚型[1]。研究人员认为SAH后72 h内发生的早期脑损伤(EBI)是SAH预后不良的主要原因[2]。已有研究表明，SAH后会导致严重的线粒体功能障碍[3]，进一步诱发细胞的氧化应激损伤和凋亡，从而导致神经细胞的损伤甚至死亡[4]，所以SAH的早期治疗成为关注的重点。

芒果苷(MF)是天然存在于许多植物中的植物多酚，具有多种药理作用，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤和治疗糖尿病等[5-6]。有研究表明，MF可通过多种途径去预防或者修复包括脑缺血再灌注损伤、脑炎等疾病；并且MF会通过影响线粒体凋亡相关蛋白的表达改善鱼藤酮诱导的细胞凋亡[7]。有研究表明，磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路可通过介导凋亡蛋白去抑制细胞凋亡[8]，而MF又具有广泛的生物活性。本实验旨在研究MF通过PI3K/Akt/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)途径改善蛛网膜下腔出血后早期阶段神经细胞线粒体功能，从而抑制神经细胞的凋亡。

1 材料与方法

1.1 细胞

Neuro-2a细胞由中国科学院上海细胞库购买。

1.2 主要试剂与仪器

青链霉素、FBS、DMEM/HIGH GLUCOSE培养基购于美国Hyclone公司，DMSO、高速低温离心机、多功能酶标仪均购于美国Thermo Fisher Scientific公司，氧合血红蛋白(OxyHb)购于上海源叶生物科技有限公司，MF购于美国MCE公司，MTT、JC-1荧光探针、DCFC-DA荧光探针、线粒体绿色荧光探针、溶酶体红色荧光探针、细胞线粒体分离试剂盒、二喹啉甲酸(BCA)蛋白定量试剂盒均购于上海碧云天科技有限公司……