王君怡，李荣，许文荣，江佳佳

(1.江苏大学附属澳洋医院澳洋肿瘤研究院，江苏张家港215600；2.江苏大学医学院，江苏镇江212013)

外泌体是由细胞内多囊泡体通过膜内陷包裹内容物并与细胞膜融合后被释放到胞外的一类微小囊泡[1]，在血液、尿液、脑脊液、唾液、母乳、羊水、淋巴液和胆汁等多种体液中均可检出外泌体[2]。外泌体包裹蛋白质、脂质、核酸及代谢物等生物活性物质，参与机体免疫应答、抗原提呈、细胞迁移、细胞分化、肿瘤侵袭等过程[1]。近年来，外泌体高通量组学筛选与分析检测技术已取得明显进展，外泌体分子标志物的检验及应用实现新的突破。为此，本文将讨论不同来源的外泌体分子标志物的检测方法及其应用价值。

1 外泌体提取

1.1体液样本采集与预处理 血液外泌体提取通常采用血清或血浆样本。血清样本用于外泌体微小RNA检测，EDTA抗凝血浆常用于外泌体RNA分析。EDTA抗凝血室温以2 500×g离心15 min去除血小板，收集上层血浆再次离心后即可获得。

尿液具有无创、简便、量大等优势，尿液外泌体miR-142-3p、miR-142-5p、miR-223-3p和前列腺特异抗原组合可显著提高前列腺癌诊断效率[3]。尿液收集后通常需加入蛋白酶抑制剂以防外泌体表面蛋白分子降解，再以4 ℃、3 000×g离心15 min即可。

脑脊液外泌体miRNA-9-5p和miRNA-598可作为阿尔兹海默症的潜在生物标志物[4]。腰椎穿刺或术中采集脑脊液时应避免穿刺损伤带来的血液污染。所获样本以4 ℃、3 000×g离心15 min。

唾液外泌体GOLM1-NAA35嵌合RNA可作为食管鳞状细胞癌的早期诊断标志物[5]。唾液具有非侵袭性、易收集、依从性高等优势。……