张新杰，徐晓薇，王朝，王学韬，吕玲，蔡春泉，舒剑波

(天津市儿童医院&天津大学儿童医院a.儿科研究所，b. 内分泌科，天津 300134)

先天性肾上腺皮质增生症(congenital adrenal hyperplasia ,CAH)是一种常染色体隐性遗传病，其中最为常见的是由CYP21A2基因缺陷引起的21 羟化酶缺乏症(21-hydroxylase deficiency,21-OHD)，占比高达90%～95%。在2019年上海浦东召开的临床遗传学高峰论坛上，各专家均呼吁重视罕见病基因携带者的筛查。早期的筛查可降低新生儿死亡率、减少因女婴外生殖器男性化而造成的性别误判，同时改善其生长发育。因此，针对人群中21-OHD患者及携带者的CYP21A2致病基因热点突变筛查具有重要意义。

21-OHD患者可根据其临床表型分为失盐型、单纯男性化型、非经典型3种。在失盐型中最常见的基因突变位点为CYP21A2基因I2G和 p.Q319X位点，在单纯型中最常见的位点为I2G和p.I173N位点[1-5]。本研究建立的高分辨熔解曲线(high resolution melting curve, HRM)主要针对c.293-13A/C>G(I2G)、c.518T>A(p.I173N)、c.955C>T(p.Q319X)以及c.1069C>T(p.R357W)突变进行筛查。该技术具有高灵敏度，可检测出基因中单个碱基的差异，并能初步识别DNA片段中的序列变体，目前已被成功应用于多种遗传病的基因突变检测，包括地中海贫血、Rett综合征、Klinefelter综合征[6-8]等。然而，其应用于检测CYP21A2基因突变的相关报道少见[9]。本研究采用HRM技术筛查21-OHD患者CYP21A2基因突变，报道如下。

1 材料与方法

1.1研究对象 收集2009年1月至2014年12月于天津市儿童医院内分泌科门诊就诊或内分泌病房住院且未经过临床治疗的21-OHD患者15例，其中男7例，女8例，年龄(2.6±2.7)岁。各患者21-OHD特异性实验室检查指标——血浆17-羟孕酮(17-OHP)的浓度为(143.3±96.5)ng/mL。同时排除非21-OHD引起17-OHP升高的11-羟化酶缺陷症、P450氧化还原酶缺陷症、17-羟基脱氢酶缺陷症及17,20-裂解酶缺陷症等。另收集同……