殷杰 赵永祥 薛江东 刘锴 李彬 马德慧

摘要： 为研究宿主细胞核糖体蛋白L12（RPL12）在猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus， PRRSV）复制中的作用，本研究通过荧光定量PCR和Western-blotting等方法，检测了PRRSV感染对Marc-145细胞中RPL12表达的影响，以及过表达或敲减RPL12对PRRSV复制的影响。结果显示，PRRSV感染可上调Marc-145细胞中RPL12基因的表达。过表达RPL12可促进PRRSV的复制，而敲减RPL12可抑制PRRSV的复制。通过免疫共沉淀和共聚焦显微镜检测，进一步研究发现RPL12蛋白与PRRSV GP2b蛋白存在相互作用，并共定位于细胞质中。本研究首次发现了宿主蛋白RPL12能够促进PRRSV复制，并与PRRSV GP2b蛋白存在相互作用，为进一步研究PRRSV的感染与复制机制以及与宿主的相互作用提供了新的切入点，为抗病毒药物的研发提供了有益的探索。

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）;核糖体蛋白L12（RPL12）;PRRSV GP2b蛋白

中图分类号： S852.65 文献标识码： A 文章编号： 1000-4440（2021）03-0686-08

Role of ribosomal protein L12（RPL12） in porcine reproductive and respiratory syndrome virus replication

YIN Jie1，2， ZHAO Yong-xiang2， XUE Jiang-dong1， LIU Kai1， LI Bin2， MA De-hui1

（1.College of Animal Science and Technology， Inner Mongolia University for Nationalities， Tongliao 028000， China;2.Institute of Veterinary Medicine， Jiangsu Academy of Agricultural Sciences， Nanjing 210014， China）

Abstract： To study the role of host cell ribosomal protein L12 （RPL12） in the replication of porcine reproductive and respiratory syndrome virus （PRRSV）， real-time quantitative PCR and Western-blotting were performed to detect the effect of PRRSV infection on the expression of RPL12 in Marc-145 cells and the effect of over-expression and knockdown of RPL12 on the replication of PRRSV. The results showed that PRRSV infection could up-regulate the expression of RPL12 in Marc-145 cells. Over-expression of RPL12 promoted the replication of PRRSV， while knockdown of the RPL12 inhibited the replication of PRRSV. Through co-immunoprecipitation and confocal microscopy analysis， further study found that RPL12 protein interacted with PRRSV GP2b protein and co-localized in the cytoplasm. This study reported for the first time that the host protein RPL12 could promote PRRSV replication and interact with PRRSV GP2b protein， which provides a new cut-in point for further research on the mechanism of PRRSV infection and replication， and also provides a beneficial exploration for the development of antiviral drugs.

Key words： porcine reproductive and respiratory syndrome virus（PRRSV）;ribosomal protein L12 （RPL12）;PRRSV GP2b protein

猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）是猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）的病原体[1]，是一种有囊膜的单股正链RNA病毒，是冠状病毒科成员[2]，在分类上属于动脉病毒属[3]。该病毒主要引起怀孕母猪早产、流产以及木乃伊胎等繁殖障碍，也会引起公猪精液质量下降，仔猪和育肥猪呼吸困难等症状[4]。病毒在扁桃体、肺和淋巴器官中持续复制，可抑制宿主先天免疫[5-8]。另外，PRRSV经常与猪圆环二型（PCV2）猪瘟等病毒和副猪嗜血杆菌等细菌存在混合感染[9-11]，而且PRRSV存在毒力返强、变异以及与临床毒株发生重组的风险，防控难度大，给中国养猪业造成了巨大损失。目前，PRRSV感染与复制机制还未完全闡明，特别是宿主蛋白质在病毒复制中的作用的研究尚不深入，解析这些问题有助于理解PRRSV的致病与免疫机制，有助于制定PRRSV防控措施。……