羟基积雪草苷对大鼠创伤性颅脑损伤后神经功能障碍的改善作用及机制研究
2021-07-23贾颜锋
贾颜锋,陈 伟
1.西安交通大学第一附属医院神经外科,西安 710061;2.西安交通大学附属西安市人民医院神经外科,西安 710004
在创伤性颅脑损伤(traumatic brain injury,TBI)后继发的复杂病理生理进程中,受损脑组织产生的兴奋性氨基酸过量聚集,可通过作用于神经元细胞膜N-甲基-D-天门冬氨酸 (N-methyl-D-aspartic acid,NMDA) 受体,引起兴奋性神经毒损伤和细胞凋亡,是造成TBI后神经功能障碍的重要因素[1-2]。研究表明,细胞表面的NMDA受体2B亚基 (NMDA receptor 2B,NR2B) 磷酸化水平与表达量越高,其对兴奋性氨基酸的毒损伤易感性越强[3-4]。因此,抑制TBI后NR2B与磷酸化NR2B (Phosphorylated NR2B,pNR2B) 表达水平,可能是阻止NMDA受体介导的兴奋性神经毒损伤以及连锁效应的有效途径。
羟基积雪草苷(madecassoside,MC)是提取自伞形科植物积雪草的三萜类化合物,是积雪草的主要药理活性成分,具有抗氧化应激、抗炎、促进创面愈合等多种功效[5-6]。新近研究发现,MC对中枢神经系统退行性病变和缺血性疾病具有神经保护作用[7]。然而,MC对颅脑损伤的实验研究未见报道。本文通过建立大鼠TBI模型,观察MC对颅脑损伤后神经功能障碍的改善作用,并从兴奋性毒损伤效应引起神经元凋亡的角度初步探讨MC的可能作用机制,为其应用于TBI的脑保护治疗提供新的研究依据。
材料与方法
1 主要设备与试剂
控制性皮层损伤打击装置(美国Hatteras 公司);免疫印迹电泳装置(美国Bio-Rad公司);NR2B抗体和pNR2B抗体(武汉博士德生物工程有限公司);B细胞淋巴瘤-2(B cell lymphoma,Bcl-2)基因抗体、半胱天冬酶-3(Caspase-3)抗体和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X,Bax) 抗体(美国CST公司);β-actin抗体(美国Thermo Fisher公司);Western-blotting检测试剂盒和BCA蛋白定量试剂盒(北京碧云天生物科技有限公司);……
