王 开， 荆得宝， 于素平， 刘雪阳

（海军军医大学附属公利医院口腔科，上海 200135）

炎性衰老的典型表现是牙槽骨丧失导致的牙齿脱落和面型改变。因此，抑制口腔牙周炎症，促使口腔颌骨再生，维持牙齿稳定，成为我们面临的问题。骨髓间充质干细胞（BMSCs）是一种异质的基质细胞群，具有自我更新及多向分化的潜能，能生成分化为多种其他细胞系，是现代组织工程研究、基因治疗和细胞免疫替代治疗中的种子细胞，尤其在维持骨吸收和骨形成的骨稳态中具有极其重要的作用[1-2]。

沉默信息调控因子6（Sirt6）是一种依赖烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide,NAD）的脱乙酰化酶，具有腺二磷酸（adenosine diphosphate,ADP）核糖基转移酶活性，可保护机体免受衰老和疾病的侵袭。此外，Sirt6通过减少活性氧类（reactive oxygen species,ROS）的产生和蛋白激酶B（protein kinase B，PKB）的磷酸化，抑制了肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导的血管外膜成纤维细胞的炎症[3]。过表达Sirt6可通过诱导椎间盘退变（intervertebral disc degeneration,IDD）模型中NP细胞的自噬来抑制NP细胞的衰老和凋亡[4]。本研究采用脂多糖（LPS，10 μg/mL）来诱导大鼠BMSCs的炎症反应，检测Sirt6在炎症大鼠BMSCs中的骨生成作用，为进一步加深对Sirt6生物学功能的理解，也为研究Sirt6在BMSCs成骨分化中的作用提供新见解。

1 材料和方法

1.1 实验动物

3～4周龄SD大鼠2只，体质量为250～300 g/只，雌雄不限，由同济大学实验动物中心提供。

1.2 实验试剂及仪器

DMEM培养液（Gibco公司，美国）；胎牛血清（杭州四季青公司，中国）；L-抗坏血酸400 μL、β甘油磷酸钠2 mL、地塞米松20 μL、ELISA检测试剂盒（Sigma公司，美国）；TRIzol试剂盒（Invitrogen公司，美国）；Sirt6抗体（1∶2 000）、OCN抗体（1∶2 000）、ALP抗体（1∶1 000）、BSP抗体（1∶2 000）（Abcam公司,英国）；GAPDH（1∶2 000）（CST公司，美国）；山羊抗兔IgG（Beyotime公司，中国）；……