刘东亮 马秀岚

中耳胆脂瘤的病理特征是异常强大的增殖和失调的凋亡。目前在增殖方面已经基本达成共识，但在凋亡方面的观点尚未达成一致，有学者认为胆脂瘤中促进凋亡因素起了主要作用，而另一些研究却发现抗凋亡也发挥了作用(kojima,1998)。DAPI广泛用于细胞的凋亡指数检测和评定[1,2]，其通过蓝色荧光强度反映核凋亡的情况和周期，正常细胞核染色后呈弱蓝色，而凋亡小体可见近于白色的强光。故本研究利用DAPI核染色判定胆脂瘤细胞中的凋亡情况。

人类叉头框O3(forkhead box O3,FOXO3)是叉头框转录因子家族(forkheadbox，FOX)的O亚族一员，参与调节细胞周期、促进凋亡、抗氧化应激在内的多种生物学行为调控[3,4]，其广泛表达于成人的各种组织器官中。FOXO3发挥其功能的方式主要是通过对其靶基因转录水平的调节来完成的[5]。唯BH3域蛋白(Bcl-2 interacting mediator of cell death,Bim)作为仅含有一个BH3结构域的Bcl-2蛋白，通过与Bcl-2家族其他成员相互作用，形成同源或异源二聚体发挥抗凋亡或促凋亡作用[6]。本研究拟通过免疫组化、免疫荧光及Western blot方法检测中耳胆脂瘤组织和正常皮肤中FOXO3、Bim及DAPI的表达情况，并分析它们之间的相关性，探讨其在中耳胆脂瘤形成过程中对细胞凋亡的作用。

1 材料与方法

1.1中耳胆脂瘤及正常皮肤标本采集 选取2019年7～12月在中国医科大学附属盛京医院耳鼻咽喉科确诊并行手术的中耳胆脂瘤标本30例，其中，男18例，女12例；年龄16～80岁，平均55.57±18.67岁；左耳14例，右耳16例；病程2～30年，平均17.63±12.33年；术后均经病理诊断为中耳胆脂瘤。同时回收耳甲腔成形术中废弃及不能使用的耳后正常皮肤或皮肤碎块15例作为对照组(术前已告知患者同意并签署知情同意书)，其中男9例，女6例；……