骆佳铭，李 机，赵 伟

(南方医科大学珠江医院麻醉科，广州 510282)

心肌缺血-再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)是围术期面临的一种常见病理生理变化，严重威胁患者生命安全[1-2]，其发病机制仍不清楚。前期研究表明MIRI是多种因素共同作用的结果[3-4]，在急性心肌缺血再灌注状态中氧化应激发挥了显著破坏作用[5-6]。当发生心肌缺血再灌注时，活性氧(reactive oxygen species,ROS)暴发超过了机体捕获清除的能力时可破坏细胞膜结构的完整性，造成MIRI。氧化应激是如何导致MIRI后心肌细胞损伤和死亡，至今尚不明确。

相关研究表明，氧化应激是导致细胞DNA损伤的重要因素之一[7]。DNA 作为生物体最重要的遗传物质，其稳定性决定了生物的生存和发展。但生物体本身基因的完整性容易受内、外环境因素影响，辐射线的伤害或化学试剂的破坏均可导致DNA 的双键结构断裂而造成损伤。前期研究发现，MIRI过程中心肌细胞内ROS水平增高[6,8-9]。由此推测，MIRI病理过程中氧化应激产生的ROS很可能是导致心肌细胞DNA损伤的重要因素。

本研究在大鼠心肌H9C2细胞缺氧/复氧模型上检测细胞内氧化应激导致的DNA损伤，并通过加入抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine，NAC)论证由氧化应激导致的DNA损伤在MIRI发病过程中的作用。

1 材料与方法

1.1 材料

大鼠心肌H9C2细胞购自中科院上海细胞库(目录号GNR 5)；一抗Bcl-2(货号：#3498)、Bax(货号：#1479)、Cytochrome c(货号：#12963)、Phospho-Histone H2A.X (S139)(货号：#9718S)和β-actin(货号：#4967)抗体购自美国CST公司；8-OHdG(货号：#sc-66036)抗体购自美国Santa Cruz Biotechnology公司。

1.2 方法

1.2.1细胞培养

大鼠心肌H9C2细胞是来源于胚胎期BD1X大鼠心脏组织的亚克隆细胞系，由于来源于心脏，常作为心脏成肌细胞用于心肌疾病的研究。……