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着丝粒蛋白U(CENPU)在卵巢癌中的高表达及其临床病理学意义

2021-07-08任英俊张晶晶刘志平

关键词:水平检测

任英俊,张晶晶,刘志平

(1郑州大学附属郑州中心医院妇产科,郑州 450007;2新郑市公立人民医院妇产科,郑州 451100

据2018肿瘤年报统计,卵巢癌(ovarian cancer,OC)发病率居女性所有恶性肿瘤的第4位和死亡率居第3位[1]。近年来,虽然对OC的研究已取得重大进展,但OC患者的5年生存率仍不理想[2,3]。而阐明影响OC进展的关键分子标志物,对今后开发靶向治疗和改善OC患者的存活结果至关重要。

着丝粒蛋白U(centromere protein U,CENPU)也称为MLF1IP和KLIP1,是常驻性着丝粒结合蛋白之一,近来研究发现其在乳腺癌、肺癌和膀胱癌等多种恶性肿瘤中表达上调,且其表达水平与肿瘤进展与远端转移呈正相关[4-6],而其在OC中的恶性生物学功能与机制并不十分清楚。因此,本研究检测CENPU在OC中表达情况,分析其表达与OC临床病理特征的关系,并进一步观察OC细胞中CENPU 表达水平与细胞增殖、迁移和侵袭的关系及相关机制。

材料与方法

1 细胞与试剂

人正常卵巢上皮细胞 IOSE80由上海雅吉生物科技有限公司提供,卵巢癌细胞HO-8910和3AO由美国ATCC提供;胎牛血清和DMEM培养基购自美国Gibco公司,CENPU短发夹RNA(sh-CENPU)、对照短发夹RNA(sh-Con)、CENPU抗体和GAPDH抗体购自美国Santa Cruz公司,Lipofectamine 2000试剂购自美国Invitrogen公司,CCK-8试剂盒、增强性ECL化学发光试剂盒和HRP标记的抗兔或抗小鼠IgG二抗购自上海碧云天生物科技有限公司,PI3K、p-PI3K、AKT和p-AKT抗体购自美国Cell Signaling Technology公司,姬姆萨染色液、RIPA裂解液、BCA蛋白定量试剂盒和生物素-链霉卵白素免疫组织化学染色试剂盒购自均北京索莱宝生物科技有限公司。

2 临床标本收集

选取2018年5月—2019年10月间郑州大学附属郑州中心医院行肿瘤切除术的40例OC患者的OC组织和癌旁组织,分为两部分,一部分直接冻存于-80℃冰箱,另外一部分用石蜡包埋后留存。……

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